水处理生物学第三章细菌的生长和遗传变异1介绍.ppt

第三章 细菌的生长和遗传变异 主要内容 3-1 细菌的生长及特性 3-2 细菌的遗传与变异 ①涂片染色法 计数器(血球计数板）测定法 ②滤膜染色法 一定量样品过滤到滤膜上，然后染色计数。 需要知道滤液的体积和滤膜的面积。 在显微镜下计数，方法相同。 ③比例计数法 比例——样品菌液与等体积（或成一定比例）的血液混合，观测二者比例 有必要区分细菌的死活吗？ 饮用水中卫生细菌学标准是TBC100个/mL（平板计数的标准），如果我们采用染色显微镜检测技术对刚刚加氯消毒的饮用水进行检测，可能会发现细菌数量会远远超过100个/mL，是不是饮用水就是不合格的饮用水呢？ 吖啶橙（AO）染色直接计数（AODC） 吖啶橙染色直接计数法（AODC）：水样采集后迅速加入甲醛固定，甲醛最终浓度2%；取10mL固定后水样加入0.5mL0.2%吖啶橙（Acridine Orange，Sigma公司）染色1~2min.；将染色水样经滤膜（孔径0.2μm，直径25mm，黑色聚碳酸脂滤膜，Nuclepore公司）过滤；过滤后将滤膜置于载玻片上，用落射荧光显微镜（日本Nikon，EF-D型）计数视野中发橙色或绿色荧光的菌体；显微镜光源为200W汞灯，激发光滤光片为450~490nm，光束分离滤光片510nm，阻挡滤光片520nm。 BacLight染色直接计数法(一种核酸探针 ) BacLight染色直接计数