猪囊尾蚴dUTPase的表达、活性分析及结构预测.pdf

结构，该结构显示CYdUTPase的活性区是由3个亚基各自的p-发夹、a一螺旋和C端环肽链共同 dUTPase的四级结构与已知 组成，这与大多数三聚体dUTPase的催化活性区结构相一致。将CY dUlPa靼四 三聚体dUTPase的晶体结构进行叠合，结果显示两者能很好的吻合，证明构建的CY 级结构合理。成功构建的CYdUTPase3D模型为抗囊虫药物的设计和开发提供了～个良好的研究 模型。 通过在线服务器设计CY hairpin DNA)时，在其3’端引入一段与鼠u6启动子3’端同源互补序列，5’端则加入一段下游通用引物， 设计好的shDNA由IDT公司合成。从鼠的肌肉中提取基因组并扩增出u6启动子序列，将u6启 cassettes，SECs)·选取 dUTPase的siRNA表达盒(siRNA 用重叠延伸一步法制备CY expression actin)作为内参照，建立了CY 猪囊尾蚴肌动蛋白基因(clonepAT5 dUTP勰e 的检测方法。CYdUTPase干涉表盒的制备和半定量RT-PCR的检测方法的建立，为CY 基因RNAi的研究奠定了基础，同时也为囊虫病反义药物的研制提供了理论依据。 关键词： 猪囊尾蚴，dUTPasc，克隆表达，活性分析，同源建模，siRNA表达盒 II Abstract caused all zoonoticdisease．Itis byTaeniasoliumis important particularly Cystieereosis South and ofAfricaand incentralAmerica,northernAmericasome Asia．The prevalent parts ofsix diseasesissued not abouta byWHO，has brought disease，oneurgently-eradicating only also the health．Vaccinesand which economic have great loss，butendangeredpublic drugs many defectsare to ofnewvaccineand becomesa wayspreventcysticercosis．Thedesign drug primary for control criticalelement successfulstrategies．TheubiquitousenzymedUTPase， developin