2017年临床检验技师考试生化检验第五章重要考点.docVIP

2017年临床检验技师考试生化检验第五章重要考点.doc

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2017年临床检验技师考试生化检验第五章重要考点(2) 常用血清酶和同工酶测定的临床意义 一、肌酸激酶(CK) (一)连续监测法测CK CK是由两种不同的亚基M和B组成的二聚体,正常人体中有三种同工酶, CK-BB(CK1):主要存于脑组织、前列腺、肠、肺、膀胱、子宫、胎盘及甲状腺中; CK-MB(CK2):主要存于心肌; CK-MM(CK3):主要存于肌肉组织。 CK作用后生成的磷酸肌酸含高能磷酸键,是肌肉收缩时能量的直接来源。 1.原理 本法采用酶耦联反应测定CK活性浓度。 在340nm监测NAD(P)H的生成量,可计算出CK的活性浓度。 2.生理变异 年龄、性别和种族对CK含量都有一定影响。新生儿CK常为正常成年人的2~3倍。CK含量和肌肉运动密切相关,其量和人体肌肉总量有关,男性参考值高于女性可能与这点有联系。白种男性CK均值为黑种人的66%,可能与种族有关,但也不排除两个人种之间体力劳动的差别。 3.参考值:男性38~174U/L(37℃);女性26~140U/L(37℃)。 4.临床意义 (1)CK主要用于心肌梗死的诊断 心肌梗死发生后2~4h此酶即开始升高,12~48h达最高峰值,可高达正常上限的10~12倍,在2~4天降至正常水平。此酶对诊断心肌梗死较AST、LD的阳性率高,特异性强,是用于心肌梗死早期诊断的一项较好指标,同时对估计病情和判断预后也有参考价值。应注意测定时受样品溶血情况的影响。 病毒性心肌炎时CK也有升高。 (2)肌营养不良症、皮肌炎、骨骼肌损伤等也可致CK升高; (3)脑血管意外、脑膜炎、甲状腺功能低下等疾病及一些非疾病因素如剧烈运动、各种插管及手术、肌肉注射冬眠灵和抗生素等也可能引起CK活性增高; (4)甲状腺功能亢进,长久卧床者总CK(主要为CK-MM)可下降。 表3-5-1 常见疾病的血清总CK和CK同工酶变化   疾病   总CK   CK同工酶   急性心肌梗死   常用酶中升高最早(4~8h),24h达峰值,2~3d恢复正常,中度升高   确诊心梗试验之一,大于总酶的6%有意义,2~3d恢复正常   心肌炎肌肉损伤(挫伤、手术、肌注、剧烈运动等)   急性期轻度升高,可达5倍正常上限,升高程度和操作程度相关,严重者可达10000U/L以上,肌注仅轻度升高,一日内恢复正常   CK-MB可增高,CK-MM升高为主,CK-MB/CK活性比6%   多发性肌炎和肌炎   明显升高   主要为CK-MM   神经性肌肉疾患   正常   无变化   脑血管意外(脑出血,脑血栓)   部分患者血液和CSF中CK升高   CK-BB   甲状腺功能低下   可高达正常上限50倍   主要为CK-MM   运动试验   可轻度升高   CK-MB正常   恶性肿瘤(通常见于前列腺癌、小细胞肺癌、消化道癌)   不定   CK-BB轻度升高 (二)琼脂糖凝胶电泳法测定血清肌酸激酶同工酶 1.原理: 除了在细胞质内存在三种CK同工酶外,在细胞线粒体内还有另一种CK同工酶,称为CK-Mt。 几种CK同工酶的分子量虽然相同,但免疫特性和电泳迁移率各不相同。 在电泳时,CK-BB迁移最快,走在阳极白蛋白区,CK-MB居中,位于α2和β球蛋白区,CK-MM最慢,位于阴极γ-球蛋白区,CK-Mt迁移率最低,位于CK-MM之后。 电泳后进行酶促反应显色,观察结果。 利用前述的脱氢反应产生NADPH,其中H+经PMS(酚嗪二甲酯硫酸盐)传递给NBT(四氮唑盐)生成不溶性有色化合物可扫描定量。 2.临床意义: 正常血清中绝大部分为CK-MM的活性,含有少量的CK-MB,不超过总活性的5%。CK-BB含量极少,用一般方法测不出。 (1)CK-MB是诊断急性心肌梗死最有价值的生化指标。此同工酶对诊断心肌梗死的特异性可高达100%。 (2)心肌梗死以外的心脏疾患有时也可有血清CK—MB的轻度升高。诸如室上性心律不齐、心包炎、心肌炎、心绞痛和充血性心衰等,其升高机制可能和心肌细胞膜通透性增加有关。 (3)肌营养不良:肌肉创伤、皮肌炎患者CK-MM明显增高虽CK-MB也升高,但不超过总CK活性5%。多次肌肉注射的患者也可有CK-MM升高。 二、乳酸脱氢酶(LD) (一)连续监测法测定LD总活性 乳酸脱氢酶是一种含锌的、参与糖无氧酵解及糖异生的重要酶,能可逆地催化乳酸和丙酮酸之间的氧化还原反应,在人及动物组织中广泛存在。LD是由H亚基和M亚基构成的四聚体,不同的组合方式构成五种同工酶。 人体以心、肾、骨骼肌含量最丰富,其次为肝、脾、胰及肺组织含量亦较多。 1.原理 340nm处吸光度的增加速率与样品中LD活性成正比。 2.生理变异 血清LD高低和性别关系不大,婴儿酶活性可达成年人两倍,儿童和少年活性比成年人高

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