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现代生物科技专题复习 （一）动物细胞的培养 植物组织培养和动物细胞培养的比较 植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 1)精子获能: 精子必须在雌性动物的生殖道发生相应的生理变化后,才获得受精能力的生理现象. 2)卵子的准备: 在输卵管中发育到减数第二次分裂的中期,才具有与精子受精的能力 1)顶体反应 顶体内的酶释放出来并溶解放射冠内的卵丘细胞。 2)透明带反应 透明带反应是防止多精入卵受精的第一道屏障 2)卵黄膜封闭作用 卵黄膜封闭作用是防止多精入卵受精的第二道屏障 3)雌、雄原核形成 雄原核形成和雌原核形成 4)原核融合形成合子 雌雄原核融合形成合子(受精卵) 体外受精 1.概念:将雌性动物的早期胚胎,或者通过其他方式得到的胚胎,移植到同种的.生理状态相同的其他雌性动物的体内,使之发育为新个体的技术. 供体：提供胚胎的个体。 受体：接受胚胎的个体。 受精卵 卵裂期 桑椹胚 囊胚 原肠胚 组织器官形成 ：在透明带内进行有丝分裂，细胞数量不断增加，但胚胎总体积并不增加，或略有减少。 ：由具有全能性细胞构成，细胞数在32个左右，排列紧密，形似桑椹 内细胞团：发育成胎儿各组织 滋养层细胞：发育成胎膜和胎盘 最初发育在输卵管进行有丝分裂 外胚层 中胚层 内胚层 原肠腔 胚胎的早期培养 胚胎移植的概念 * 工具 基因工程 操作程序 应用 限制酶：来源、特点、作用 DNA连接酶：种类、作用 载体：作用、必需具备的条件、种类 获取目的基因:3种方法；PCR原理、前提、条件、过程，结果 构建基因表达载体：作用；组成及各组分的作用； 导入受体细胞：植物、动物、微生物 目的基因的检测和鉴定：分子水平（存在；转录；翻译）；个体水平 动物 植物 医疗卫生：乳腺生物反应器、基因治疗 植物细胞工程 动物细胞工程 细胞工程 动物细胞培养 体细胞核移植技术 与克隆动物 动物细胞融合 单克隆抗体 过程 条件 应用 概念 过程 应用前景 概念 过程 应用 植物组织培养 植物体细胞杂交技术 原理、过程、条件 过程、概念优势 胚胎工程 体内受精和早期胚胎发育 精子和卵子的发生 受精 精子的发生 卵子的发生 准备阶段 受精阶段 体外受精和早期胚胎培养 试管动物技术 卵母细胞的采集和培养 精子的采集和获能 受精 体外受精 胚胎移植的现状和意义 早期胚胎培养 胚胎移植 胚胎工程的应用及前景 精子的获能 卵子的准备 早期胚胎发育 胚胎移植的生理学基础 胚胎移植的基本程序 胚胎分割 胚胎干细胞 1、原理：细胞的全能性 2、过程： 离体的植物器官 组织或细胞 愈伤组织 胚状体 试管苗 脱分化 再分化 植株 无菌条件 植物组织培养条件： 离体、营养物质、植物激素、一定的温度、适合的PH、适时光照、无菌环境。 植物组织培养 杂种植株 融合的原生质体AB 再生出细胞壁 脱分化 愈伤组织 再分化 1、过程 植物细胞的融合 植物组织培养 植物细胞A 原生质体B 原生质体A 杂种细胞AB 去 壁 去 壁 人 工 诱 导 植物细胞B 植物体细胞杂交技术 2、概念 将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。 3、优势和未解决的问题 优势（与有性杂交方法比较） ：打破了不同种生物间的生殖隔离限制，大大扩展了可用于杂交的亲本组合范围。 未解决的问题：未能让杂种植物按照人们 的需要表现出亲代的优良。 植物体细胞杂交技术 幼龄动物 取动物器官 和组织 剪碎组织 胰蛋白酶处理 细胞培养 单个细胞 动物细胞培养技术：是其他动物细胞工程技术的基础 原理：细胞增殖（有丝分裂） 3、动物细胞培养过程： 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 细胞悬浮液 胰蛋白酶 10代细胞 原代培养 50代细胞 传代培养 细胞株 无限传代 细胞系 单个细胞 加培养液 遗传物质未改变 遗传物质已改变 （分解细胞） 2、培养条件： 无菌无毒环境、 充足营养、 适宜温度、PH 气体环境； 3、 应用 （1）生产有价值的蛋白质制品，（如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体、动物激素） （2）检测有毒物质 （3）用于生理、病理、药理等方面的研究 （一）动物细胞培养 （二）细胞核移植技术和克隆动物 将动物的一个细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成为一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体（克隆动物） 分 类 胚胎细胞核移植： 体细胞核移植： 细胞分化程度低，恢复全能性容易 细胞分化程度高，恢复全能性不容易 1 、动物细胞核移植概念： 1、在畜牧业中可以加速家畜遗传改良的进程 2、保护濒危物种 3、医药卫生领域生产医用蛋白质及组织器官的移植