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与离心机相关的知识
第一节 离心技术及其基本原理
离心技术是将含有微小颗粒的悬浮液置于离心转子中,利用转子绕轴旋转产生的离心力将微小颗粒按密度或质量
的差异将其分离的方法。
一、基本原理
1、重力场中的沉降
将含有微粒的悬浮液静置一段时间,液体中的微粒受重力作用,使得较重的微粒下沉与液体分开,即为”重力沉降” 。
微粒在介质中的沉降受到介质的浮力、介质阻力和扩散现象的影响。
2、相对离心力
离心技术是根据微小颗粒在离心力场中的行为建立并发展起来的。离心机转子能够以稳定的角速度作圆周运动,
从而产生一个强大的辐射向外的离心力场,它赋予处于其中的任何物体一个离心加速度。使之受到一个向外的离心力。
离心机所产生的离心力场 G ,可由下公式计算
G=ω2r ω—转子的角速度 r—旋转半径(物质质点所处位置与旋转中心的距离)
离心力场常用相对离心力RCF (Relative Centrifugal Force,RCF)来表示。相对离心力的大小用相当于地心引力(重
力加速度,g )的倍数来表示,即:
RCF=ω2r/g×g=(2πn)2r/602g×g=1.119×10-5×n2r×g
N—转子转速,rpm/min g—重力加速度,980.6cm/s2
3、沉降速度
沉降速度是指在强大的离心力作用下,单位时间内物质颗粒沿半径方向运动的距离。
被分离物质颗粒(或大分子)在离心管中与转子一同旋转时承受着沿半径方向的直接离心力Fc 作用。 Fc=Mω2r,
M—被分离物质颗粒的质量。
其沉降速度v 为;v=6.092×10-4×D2 (ρ-ρm)n2r/ηm
D—颗粒直径,cm;ρ和ρm 分别为颗粒和介质的密度,g/cm3;ηm—介质粘度,单位帕•秒Pa•s
1
由此看出,颗粒沉降速度与三个方面因素有关:
a、颗粒本身性质:沉降速度与颗粒直径和密度成正比。密度相同时大颗粒比小颗粒沉降快;大小相同时,密度大的比
密度小的沉降快。
b、介质性质:沉降速度与介质粘度、密度成反比,介质粘度、密度大则颗粒沉降慢。
c、离心条件;颗粒沉降速度与离心时转速和旋转半径成正比。如其它条件不变,沉降速度随着r 的增大而增大,在进
行速度区带离心时,r 对沉降速度的这种影响不利于达到满意的分离效果,所以需要在沿半径方向上相应的增加介质的
密度和粘度以克服r 的增加造成的影响。
4 、沉降系数
沉降系数是指在单位离心力场作用下,颗粒沉降的速度以S 表示:S=v/ω2r
细胞及细胞的各种组成成分的沉降系数有很大的差异,我们可用生物样品的沉降系数的差异采用离心技术将它们彼此
分离开来。
细胞及细胞内某些沉降系数范围和离心条件
名称 沉降系数,S 相对离心力,g 离心转速,r/min
细胞 107 200 1500
细胞核 4×106—107 600——800 3000
线粒体 2×104—7×104 7000 7000
微粒体 102—1.5×104 1×105 30000
DNA 102 2×105 40000
RNA 4—50 4×105 60000
蛋白质 2—25 4×105 60000
2
第二节 离心机的构造
离心机可按额定的最高转速大小分类:低速离心机,10×103rpm;
高速离心机,10×103—25×103rpm;和超速离心机,30×103rpm。一般常用的台式离心机转速为4000rpm 。其主要
部件为:电机和转轴。随转速增加会加设冷冻和真空设备。
(一)离心室
离心室是转子在真空、低温下进行高速运转的场所。由内外两层钢筒构成。内层一般为防腐的不锈钢制作,外层
多为10mm 的钢板制成。中间设有制冷的蒸发器。筒上装有钢盖,只要离心机处于运转状态就自动锁死。
(二)驱动系统
主要由电机和转轴组成。老型号多采用变速齿轮箱,利用齿轮轴,同时为防止齿轮摩擦还要配备润滑系统。而新
型号则采用变频电机直接驱动转子,结构简单且效率提高。
(三)冷冻系统
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