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植物生理学实验 2009.9 • 课程目标 • 与植物生理学理论知识相应的基本实验 • 植物生理学研究的基本思路 • 植物生理学实验课的开展形式 • 植物生理学实验课的内容和具体安排 • 实验课的基本要求 • 植物生理学实验课的考核形式 一. 课程目标 • 掌握基本的植物生理学实验技术，达到 能够针对具体的植物生理学问题进行研 究。 • 以能够解决植物生理学问题为主 二. 与植物生理学理论知识相应的 基本实验 1. 水分生理* 在生理学中围绕着水分通常要考虑三个方面的问题： ①衡量水分运动规律或反映植物和环境水分状况的水势； ②反映植物代谢活动的植物含水量，包括自由水和束缚 水； ③体现环境条件并与植物生理过程相适应的植物体对水分 的吸收、运输和排出：蒸腾强度、气孔密度和气孔 开度。 1. 水分生理的基本实验 • 实验1-1 植物组织中自由水和束缚水含量的测定* • 实验1-2 植物组织渗透势的测定（质壁分离法）* • 实验1-3 植物组织水势的测定(液体交换法)* Ⅰ小液流法 • 实验1-4 蒸腾强度的测定 • 实验1-6 植物叶子气孔密度和面积的测定 • 实验1-7 钾离子和ATP对气孔开度的影响* 2.矿质营养 植物的矿质营养的知识和研究方法目前 仍然在现代农业、林业、园艺等生产上大量 应用。除了元素的体内外测定方法外，在研 究领域还经常考虑反应植物代谢强弱的有： ①根系体积与活力； ②对生命元素N 的代谢指标硝酸还原酶活性以 及总N含量。 2. 矿质营养的基本实验 • 实验2-6 根系体积的测定* • 实验2-7 根系活力的测定* Ⅰα-萘胺氧化法 Ⅱ 氯化三苯基四氮唑(TTC)法 • 实验2-8 硝酸还原酶活性的测定* Ⅰ活体法 Ⅱ离体法 • 实验2-11 植株中硝态氮的测定* 3. 光合作用 光合作用是植物生理学中的核心知识，从知识结构上包括两部分， 一是光合作用的机理，二是环境条件和光合作用效率的关系，前者 是后者的基础。反应光合作用效率大小的常用指标包括： ①光合器官的结构和光合色素：叶绿体的超微结构、片层结构往往 反应其功能（C3, C4超微结构的不同）；色素是光能吸收、传导和 转化的重要物质基础，色素的含量、比例变化往往和光合效率、环 境条件有着一定的对应关系，往往是分析的重要指标； ②光合作用强度：底物CO2的消耗或产物O2的增加，或光合碳同化 产物的变化多种方法，其中红外线CO2测定是相对较准确的方法； ③反映光合磷酸化能力的叶绿体偶联因子腺苷三磷酸酶(ATPase)活 力； ④碳同化过程中的酶活力等。 3. 光合作用的基本实验 实验3-1 叶绿体色素的提取、分离及理化性质的鉴定* 实验3-2 叶绿体色素的分离和吸收光谱曲线* 实验3-3 叶绿素a、b含量测定* 实验3-4 植物光合强度的测定* Ⅰ改良半叶法 Ⅱ氧电极法 Ⅲ便携式光合测定仪法 实验3-7 环境因素对光合作用的影响* Ⅰ量气法 Ⅱ叶圆片上浮法 实验3-9 叶绿体偶联因子(CF1)提取及ATPase活性测定 实验3-10 乙醇酸氧化酶活性测定 实验3-11 二磷酸核酮糖羧化酶-加氧酶羧化活性的测定 实验3-12 二磷酸核酮糖羧化酶-加氧酶的加氧活性的测定 4.呼吸作用的基本实验 呼吸作用是生物物质代谢和能量代谢的中 心，在植物生理学中经常要考虑的是反映植 物代谢强弱的植物呼吸强度的大小，其次也 会考虑一些不同呼吸途径中酶活性的测定来 反应植物响应环境条件或发育的变化。 •实验4-1 植物呼吸强度的测定*