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宝干胶囊联合绞股蓝总苷片治疗大鼠高脂血症性脂肪肝的实验研究论文.doc
宝干胶囊联合绞股蓝总苷片治疗大鼠高脂血症性脂肪肝的实验研究论文
李旭鸿,程卫东,脱承德, 董丽
【摘要】 目的探讨绞股蓝联合宝干胶囊治疗大鼠高脂血症性脂肪肝的作用机制。方法取 42 只大鼠随机分为正常对照组、模型组、绞股蓝组、宝干胶囊组以及绞股蓝联合宝干胶囊组。除正常对照组外,其余各组饲喂高脂饲料12周造高脂血症性脂肪肝模型,造模成功后给药组给予相应的药物治疗4周。检测血清总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),天冬氨酸转氨酶(AST).freelg/片;宝干胶囊:青海普兰特药业有限公司(由黑芝麻、小蓟、酸枣仁、决明子、山药、肉桂等组成),批准文号:青卫食准字(2004)第202号,0.3g/粒。其中绞股蓝总苷片研磨,与生理盐水制成混悬液待用。给药时宝干胶囊去掉胶囊,制成混悬液,待用。
1.3 试剂
总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)试剂盒购自广州标佳科技有限公司,批号为:HN1530;超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)试剂盒购自南京建成生物工程研究所,批号其他试剂均为分析纯级。
1.4 仪器
OLYMPUS AU400 全自动生化分析仪(日本OLYMPUS 公司),万能显微镜(日本OLYMPUS公司生产)。分光光度计:岛津 UV-1700(日本岛津公司生产)。
2 方法
2.1 高脂模型的制备
实验动物用普通饲料适应性喂养,自由饮食1 周后,按照体重随机分为5组。正常组10只,普通饲料喂养。模型组8只,绞股蓝组、宝干胶囊组、宝干+绞股蓝联合用药组各8只,均喂高脂饲料,(配方:2%胆固醇+ 猪油10%+88%普通饲料,由兰州陆军总医院实验动物科提供)。实验动物自由饮水和进食,分笼(每笼4只) 饲养于(20 ±2)℃明暗各12 h 的环境中。实验第12周从模型组任选动物两只处死,取出肝脏,病理切片证明造模成功[2] 。12周后,空白组普通饮食,模型组高脂饮食,均生理盐水灌胃;绞股蓝组0.09g/kg·d灌胃,宝干胶囊组0.92 g/(kg·d)灌胃,联合组0.09 g/(kg·d)绞股蓝+0.92 g/(kg·d)宝干胶囊灌胃,给药28 d。
2.2 测定方法
给药结束后隔夜禁食,次日以1 %乌拉坦溶液10 ml/ kg腹腔注射麻醉,从股静脉采血,离心、酶法测定TC,TG,AST,ALT。严格按照试剂盒说明操作测SOD,MDA。采血完毕后处死,迅速取出肝脏,称重,10%福尔马林固定,送病理科石蜡包埋、切片、HE 染色。
2.3 统计学处理
使用SPSS10. 0统计软件±s,P <0. 05 为差异有统计学意义。
3 结果
3.1 各组大鼠肝功能指标结果见表1。表1 各组大鼠肝功能指标(略)与模型组比较,**P<0.01,*P<0.05
由表1可知,与模型组比较,绞股蓝总苷片对AST没有治疗作用;宝干胶囊对ALT没有治疗作用;联合治疗组对ALT、AST均有治疗作用(P 0.05)。宝干胶囊、绞股蓝总苷片和联合治疗组对TC、TG的均有显著统计学差异(P 0.05),3个治疗组间差异无统计学意义。
3.2 SOD、MDA的影响结果见表2。表2 各组大鼠SOD、MDA及肝重指数(略)与模型组比较,**P<0.01,*P<0.05
由表2可知,与模型组比较,宝干胶囊、绞股蓝总苷片和联合治疗组的SOD值有显著的统计学差异(P 0.01),各组之间在统计学上没有显著差异。宝干胶囊组MDA值显示有较好的疗效(P 0.05),与之相比,绞股蓝组和联合治疗组的治疗效果(P 0.01)更显著。肝指数值显示,3个治疗组均有统计学的显著差异(P 0.05),但3个治疗组间无统计学差异。
2.3 肝脏病理学变化
2.3.1 肉眼观察
正常组大鼠肝脏无异常变化。模型组肝脏体积明显增大,包膜紧张,边缘圆钝,整个肝脏呈奶黄色,并见局灶性黄白色变性灶,切面油腻。绞股蓝组和宝干胶囊组及联合用药组大鼠肝脏体积较空白组略大,包膜紧张,边缘薄,肝脏表面布满奶黄色的点状物,触之柔软。
2.3.1 光镜显示
正常对照组大鼠肝组织结构完整、清晰,肝小叶结构正常,中央静脉大而壁薄,肝细胞排列成肝索(见图1);模型对照组大鼠肝组织可见中到重度脂肪肝,以肝腺泡区为主的弥漫性肝细胞空泡变性(见图2)。绞股蓝和宝干胶囊两个治疗组大鼠肝组织脂肪变以轻中度为主,脂肪变性程度较模型对照组降低,仍然有弥漫性的细胞空泡变性,空泡体积变小明显(见图3~4)。联合治疗组的肝组织结构清晰,脂肪变以轻度为主,仅有少量散在的细胞空泡(见图5)。
3 讨论
高脂血症引起脂肪肝与长期过食脂肪、高胆固醇、低蛋白饮食,体重增加过快、内分泌失调及代谢疾病相关。因部分脂肪肝可进
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