α-突触核蛋白影响BDNF表达机制的研究.pdfVIP

中国药理通讯2012年第二十九卷第三期 ParishinC对东莨菪碱导致的大鼠长时程增强诱发抑制的改善作用 刘智慧 王伟平 王晓 良 中国医学科学院 北京协和医学院药物研究所 北京 100050 目的：研究parishinC对东莨菪碱所致长时程增强 (1ongtermpotentiation，LTP)抑制的影响。 方法：采用麻醉大 鼠在体 I．TP记录的方法，刺激大 鼠海马穿通路纤维，记录齿状回颗粒细 胞 (PP—DG通路)诱发群峰电位 (Populationspike，PS)幅度的方法，观察东莨菪碱对 LTP 的作用，以及 parishinC对东莨菪碱作用的影响。 结果：大鼠在体LTP实验结果表明，在记录一段基础PS后，给予强直刺激 (100Hz，100 串)后PS幅度与基础值比显著增强，55—60minPS幅度达到基础PS幅度的189．4±7．0％ (n 一9)；在给予强直刺激前30min腹腔注射东莨菪碱 lmg／kg，与正常组比可显著抑制LTP的诱 发，55--60minPS幅度只增强了 152．3±4．7 (pO．01VS．正常组，n一9)。在腹腔注射东莨 菪碱前 lOmin，腹腔注射给予parishinC (5、10及 2Omg／kg)，观察 parishinC对东莨菪碱抑 制 LTP诱发的影响。结果显示parishinC5mg／kg对东莨菪碱导致的LTP诱发的抑制没有显著 影响，55—60minPS增强幅度为 155．6±9．00，与东莨菪碱组比没有显著差异 (pO．05v 东莨菪碱组，n一5)；parishinC10mg／kg可显著改善东莨菪碱导致的LTP诱发，55—6Omin PS增强幅度为 190．4±12．8 (p0．05VS．东莨菪碱组，n一5)；parishinC2Omg／kg也可显 著改善东莨菪碱导致的LTP诱发，55—6OminPS增强幅度为 197．3±14．1 (vs．东莨菪碱组， pO．01，n一8)。而parishinC2Omg／kg给药前的PS幅度为 94．9±3．59／6，腹腔注射给药 40min后 PS幅度为 101．6±1．9 (p0．05VS．给药前，n一9)，说明parishinC对基础的突触 传递没有显著影响。上述结果表明腹腔注射parishinC10mg／kg和2Omg／kg可以显著改善东莨 菪碱对大鼠LTP诱发的抑制，具体机制有待进一步研究。 结论：ParishinC可以剂量依赖性地改善东莨菪碱对大鼠LTP诱发的抑制，具有潜在的促 进学习和记忆的作用 。 一 突触核蛋白影响BDNF表达机制的研究 苑玉和 陈乃宏 中国医学科学院药物研究所 北京协和医学院药物研究所 北京 100052 目的：研究a一突触核蛋白对 BDNF (brain--derivedneurotrophicfactor)表达的影响及作 用机制。方法：利用分子克隆技术构建a一突触核蛋 白真核表达载体并转染PC12，建立稳定高 表达细胞株 ；MTT法检测细胞存活率；Westernblot法、ELISA法和 Confocal检测的蛋 白表达 34 中国药理通讯2012年第二十九卷第三期 及蛋 白磷酸化的改变；双荧光素酶报告系统检测转录因子的活性；免疫共沉淀技术检测蛋 白之 间的相互作用。结果：a一突触核蛋 白过表达后细胞存活率降低，过表达a～突触核蛋 白的PCI2 细胞 BDNF蛋 白含量和 mRNA水平均明显降低；转录因子 NFB (NuclearfactorB)、NFAT (nuclearfactorofactivatedTcells)、CREB (cAMP／Ca2-l-responseelementbindingprotein)和 Nurrl参与BDNF的表达调控 ，结果发现 o一【突触核蛋 白过表达后，NFB、NFAT和CREB的转 录活性明显受到抑制，而 Nurrl的转录活性没有改变；同时发现 a一突触核蛋 白能够与PKC (proteinkinaseC)相互作用并抑制其活性，并影响PKC下游激酶ERK及GSK3的活性，上述 激酶对 NFB、NFAT、CREB具有调控作用。结论a一突触核蛋 白具