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SOP标准操作程序 LDH 乳酸脱氢酶（货号：OSR6127，OSR6227） 实验原理： 在心肌损伤、肝脏疾病、巨细胞贫血、肺栓塞、恶性脓包、皮肤炭疽、肌营养不良等疾病中测定LDH（EC 1.1.1.27）。测定LDH并结合测定CK肌酸激酶及同功酶能确诊急性心肌梗塞。 方法学： Olympus公司LDH的测定方法采用的是改良Wacker法，反应方向中乳酸转化为丙酮酸。乳酸与N AD在LDH作用下转化为丙酮酸与NADH。NADH在340nm下有强吸收，但NAD没有吸收。在340/380nm下测定吸光度的变化可以测定标本中LDH的活性。 LDH 乳酸+NAD-------------﹥丙酮酸+NADH+H 标本： 病人准备：无特殊要求。 类型：无溶血的血清或肝素化的血浆。凝固后尽快分离血清，尽量避免溶血。 标本准备： 各种不同的研究表明，LDH在不同温度下稳定性各不相同。尽管结论各不一致，但比较一致认为心脏同功酶比肝脏同功酶更加稳定。在任何性情况下，标本收集贮存要有合适的操作程序使结果一致。最好不要放在冰箱或冰冻，在室温应尽快测定。 仪器与材料: 仪器：奥林巴斯AU640生化分析仪 材料：奥林巴斯AU640乳酸脱氢酶（LDH） 参与反应成份的最终浓度： AMP缓冲液（PH 8.9） 230 mmol/L L-乳酸 70 mmol/L NAD 10 mmol/L 其中含有稳定剂与保护剂。 注意：1.此试剂为体外诊断用。 2.不要入口，吞下有害。保护剂为叠氮钠，与下水管中的铜反应形成爆炸性化合物，如果排向下水道请用大量的水冲洗。 试验用试管的直径在12～16mm。 试剂准备：奥林巴斯AU640的LDH试剂是即开即用的。无需特殊准备。 执行参数（性能参数）：以下数据是根据奥林巴斯AU640 LDH试剂已经建立的程序。 重复性：重复性的评估是根据NCCLS推荐的典型方法，AU640批内重复性小于3%，总不精密度小于5%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。 N=100 批 内 精 密 度 总 精 密 度 平均值（U/L） SD CV% SD CV% 101 0.7 0.7 2.2 2.2 174 1.3 0.8 3.6 2.1 417 2.4 0.6 7.5 1.8 方法学比较：奥林巴斯AU640 LDH（方法1）与其它奥林巴斯分析仪器（方法2），共同做182个病人标本。相关系数达到0.998，回归方程如下： LDH方法1=（LDH方法2×1.04）－0.8 病人结果数值分布：48～821U/L 敏感度：在奥林巴斯AU640生化分析仪上每分钟变化0.09毫吸光度为1U/L。 试剂的贮存：1.当保存于2～8℃，不开盖情况下至标签的失效期。 2.开盖后放于仪器中可以稳定30天。 变质指示：当试剂有浊度时，不能继续使用。 校准： 标准液的准备：这个实验不需要标准液。 校准程序：LDH的校准中基于NADH的摩尔消光系数，在340nm为6300。 质控：在每一批标本中都应把奥林巴斯水平I与II质控（DR006162）做为未知标本进行分析。 操作程序（逐步地）： AU640开机 1.认两瓶清洗剂有足够的量。 2.打开蒸馏水供应系统的阀门。 3.如果没有设定自动开机，请按分析仪器上的[POWER ON]键。 4.确认打印机为开机并处于联机状态。 5.在[Start Condition]屏幕，输入所需信息，并按F2退出。 6.如果有需要请进入password。 7.确认仪器上的在线试剂的位置是否正确、数量（体积）是否充足，不足请添加并在系统状态中的试剂状态检查试剂。 8.在急诊台Wash1的位置的试管中加满一支1N HCL的样品针清洗液。 开始分析: 1.把定标、质控、和标本架放在仪器的Rack Feed上。 2.用鼠标点击在屏幕最上方[开始分析]图标。 3.点击F2退出键退到主屏幕。 分析参数 样品体积 3微升 吐水量 0微升 试剂I体积 80微升 吐水量 0微升 试剂II体积 40微升 吐水量 40微升 波长 340/380 方法 Rate 读点 14/21 温度 37℃ 完整的实验参数与操作程序可以在AU640用户手册中查到。 计算： 无需手工计算，结果为在37℃自动以U/L打印。 报告结果: 参考范围： 140～271U/L 参考值会因年龄、性别、饮食及地域的