表达外源绿荧光蛋白的重组犬2型腺病毒的构建及其生物学特性分析.pdfVIP

第 28卷 第 2期 上 海 交 通 大 学 学 报 (农 业 科 学 版 ) ���.28��.2 2010年 4月 �����������������������������������(�������������������)A��.2010 文章编号： ： 1671-9964(2010)02-0107-06 D��10.3969/�.����.1671-9964.2010.02.003 表 达 外 源 绿 荧 光 蛋 白 的 重 组 犬 2型 腺 病 毒 的 构 建 及 其 生 物 学 特 性 分 析 1,2,3441,2,31,2,34 周 洁 ，姜 骞 ，陈洪岩 ，胡建华 ，高 诚 ，曲连东 （上海实验动物研究中心， 上海市计划生育研究所 ， 上海市实验动物质量监督检验站 ， 1.2.3. 上海 200321；4.中国农科 院 哈尔滨兽医研究，哈尔滨 150001） 摘 要：以�UC18载体为骨架质粒，犬 2型腺病毒 （ca����ad��������2，CAV-2）T������A26/61株为亲本毒株，以复制非必需区 E3的侧翼序列为同源重组臂，对外源基因的插入靶点 E3区进行了缺失，并在缺失位置插入 �CMVIE启动子�多克隆位点，增 强型绿色荧光蛋 白基因（EGFP）�SV40早期转录 ����-A信号，构建了 E3区缺失的转移载体 �UC-�E3-EGFP�该载体与 CAV-2 亲本毒株共转染 细胞，二者发生同源重组，经蚀斑筛选获得了表达 的重组病毒 �经鉴定重组 MDCK EGFP�CAV-2�E3-EGFP 病毒保持了亲本毒株的生物学性状并能够稳定表达外源基 因，动物试验证实 E3区的缺失对病毒的致病力无明显影响，为进一 步开展 CAV-2活载体疫苗研制及相关基础研究提供了技术平台� 关键词：E3区缺失；重组犬 2型腺病毒；绿色荧光蛋 白；生物学特性 中图分类号：�852.655文献标识码：A C��������������C�����������������������������C����� A�������������2E���������E����������F������������������ 1,2,34 41,2,31,2,3 4 �������,���������,��������-���,������-���,��������,������-���� (1.S�a���a�R���a�c�C�������Lab��a����A���a�,2.S�a���a�I����������P�a���dPa�������dR���a�c�, 3.S�a���a�Q�a����M���������C��������Lab��a����A���a��,S�a���a�200032,C���a; 4.Ha�b��V������a��R���a�c�I��������,CAAS,Ha�b��150001,C���a) A�������：Vacc������a����CAV-2�a��������da���������������,E3��CAV-2�������������a�������d���������������ca���� �a�c����a��a��������������������������������,a�d��’���a�����������c��a�����������a��������c������.Ba��d�������c- ����UC18,�CMVIE��������,��������c����������,EGFP����a�dSV40����-A����a�����������d�c�d������������������c� E3�������a�d�����d,��������a��d��a���d�a�d�����a��da��UC-�E3-EGFP.A������c��b��a�������UC-�