大规模微载体培养Vero细胞生产流感疫苗.PDFVIP

数据由 B a x t e r BioScience疫苗开发 组友情提供。 M a n f r e d R e i t e r 和 Wolfgang Mundt 工艺开发,B a x t e r Biomedical研究中心 Orth,奥地利 大规模微载体培养Vero细 胞生产流感疫苗 流行性感冒是一种病毒引起的呼吸系统疾病，在人群中导致高发病率 和显著的死亡率。随着20世纪40年代流感疫苗的推广，流感疫苗已经 明显减低了发病率。流感疫苗是三价的，目前的组成含有 型流感病 A 毒菌株亚型 、 及 型流感病毒菌株。传统用于疫苗生产的流 HN H3N2 B 感病毒在鸡胚内培养。使用这种传统的方法不得不对几百万个蛋胚逐 一接种和收获。生产过程很难自动化、劳动强度大、时间消耗多，且 有污染的可能。 流感病毒能够在多种动物细胞内繁殖, Baxter公司专注于Vero细胞， 1 一种可传代的猴肾细胞，其特征如表 所述。 表1.Baxter的Vero细胞平台背景资料 从ATCC (美国典型微生物菌种保藏中心 获得的非洲) 来源: 绿猴 (Cercopithecus aethiops)肾细胞ATCC CCL8  ， 988年，传代数为24 MCB (主要种子细胞库 传代数为) 28 (全面检测为无致 瘤性、无外源因子，同源一致性/遗传学稳定性) WCB (工作种子细胞库 传代数为) 33 细胞库: 标准质量控制检测项目： - 细菌和真菌无菌检测 - 支原体 - 外源因子 4 Vero 细胞在过去的二十多年里已获准用于生 微载体辅助大规模Vero 细 产人用疫苗 例如脊髓灰质炎和狂犬病疫苗( )。 虽然Vero 细胞对多种病毒敏感，可是最初流 胞技术 感病毒在 细胞上的努力失败了 ( ， )。 Vero  2 驯化Vero 细胞适应在用于大规模生产的无血 Baxter Healthcare现已开发出一种能够生产高 清无蛋白培养基内生长。带有详细传代记 效价的季节性流感和禽流感人用疫苗的技术 录的Vero 细胞冻存管被复苏；并传代到T形 ( )， 表2 也可以生产大多数其他的人用和兽用 瓶和滚瓶中，生产出足够数量的细胞以接种 ( )。 ( ， ， ) 疫苗 表3 在文献 3 4 5 中描述了Vero细 Cytodex™3微载体生物反应器。细胞汇合后， 胞技术用于疫苗开发和生产的原理和前景。