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动物细胞培养和核移医植技术
动物细胞工程
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动物细胞培养*
动物细胞融合
单克隆抗体技术
核移植
动物细胞工程常用技术
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问题讨论
烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植,但对于大面积烧伤病人来讲,健康皮肤很有限,请同学们想一想如何来治疗该病人?
取该患者的皮肤进行细胞培养,获得足量的细胞后再移植?
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动物细胞培养
请简述动物细胞培养的基本过程?
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问题
1、植物组织培养过程将组织分散成单个细胞的吗?
2、动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的吗?
3、为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的呢?
4、如何将动物组织分散成单个的细胞呢?
5、胰蛋白酶的作用是什么呢?由此可说明细胞间的物质是什么成份?
没有
是
成块的组织细胞靠在一起,彼此限制了细胞的生长和增殖
先用剪刀剪碎,后用蛋白酶处理
胰蛋白酶水解蛋白质
细胞间的成份是蛋白质(胶原蛋白等)
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思考题
6、细胞膜的主要成份是什么?
7、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗?
8、既然胰蛋白酶能将细胞消化掉,那将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢?
9、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗?为什么?
10、动物细胞培养取材时,一般是取胚胎组织或幼龄动物的组织或器官,请解释原因?
蛋白质和磷脂
能
注意时间的控制
不能,因为两者的最适PH不同,而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近
胚胎组织或幼龄动物的组织或器官分裂、增殖旺盛
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11、贴附性细胞培养瓶内表面为何要光滑、无毒?
12、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖?
易于培养细胞贴壁,进行生长增殖
当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞分裂就会停止分裂增殖,这种现象叫接触抑制。
思考题
13、如何理解原代培养和传代培养?
14、传代培养的细胞能一直传代下去吗?
上述过程中,在第一培养瓶中培养就是原代培养,之后转移到其它培养瓶中培养就是传代培养
不是都能
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17、人类一般保存的是哪类细胞呢?为什么?用于植皮的细胞培养应该不多于多少代?
保存10代以内的细胞;因为10-50部分细胞的细胞核型可能发生变化,有少部分还发生突变向癌细胞方向发展;10代
思考题
16、如此时细胞数量并未达到人们的需求,应该怎样办?细胞株和细胞系通常是培养多少代的细胞?
将贴满细胞壁的细胞用胰蛋白酶处理,然后继续增殖。这样的过程叫做传代培养;10-50代的为细胞株,50以后无限增殖的细胞群为细胞系
15、有些为何能一直传下去?动物细胞培养就是为了得到这些细胞吗?
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