线粒体DNA疾病选读.doc

线粒体DNA疾病和生殖技术发展的意义 张文敬 2015602591 杨永妍 2015602337 丁艺洁 2015602756 杨陈祎 2015602340 自从25年前首例母系遗传mtDNA疾病报道以来(Wallace et al, 1988b)，共出现三个较为有名的理论方法来解决突变线粒体基因的家族遗传问题(Sauer and Kavic, 2006)。 卵母细胞捐献是一种可以完全去除突变线粒体基因遗传可能性的简单方法。这种方法以捐献的健康卵母细胞代替有突变线粒体基因的卵母细胞。这种方法的弊端是生母的遗传特征会完全丧失，但这也是唯一一种能够保证没有遗传风险的方法。 另一种方法是从待孕母亲的瓶颈期卵母细胞中选择出突变量较低的胎体。这种方法只可以用于异质型mtDNA疾病。筛选低风险在孕初期实施绒毛膜取样(Harding et al., 1992)。在第一孕程终期检测分析绒毛膜异质性若胎儿基因呈现出高度异质性其患有(White et al., 1999)。而对同源异质性疾病或者疾病显相与突变程度相关性较低（例如LHON）时，这种方法则不适用(Black et al.,1996)。此外，如果滋养层mtDNA的突变程度对其他孕体不具有代表性，其有效性也会明显降低。这种情况出现在复制分裂开始较早时，下文会有所叙述。 第三种治疗方需要通过胚胎前的基因诊断筛选出低风险的早期胚胎(Poulton et al., 2010)。这种方法是目前临床上应用的主要方法，成功用于有mtDNA遗传疾病的家庭(Steffann et al.,2006; Monnot et al., 2011)。然而，当着床前基因诊断用于囊胚期胚胎时，标本就不能很好地反映后天异质性。运用这种技术的变体——胚囊活组织检查产前筛查基因3243A→G点突变时问题(Treff et al., 2012) Treff et al. (2012)）大体上少于一些儿童标本（血液47%，尿液52% Wallace and Chalkia (2013) and Mitalipov et al. (2014)）。目前还未知这种异质性差异是发生在滋养层和内细胞团阶段之间，还是在妊娠期间改变的。这表明胚胎前的基因诊断拷贝数变异出现于开始分化出具体功能的囊胚期细胞着床前胚胎(Lee et al., 2012)。这是一种普遍现象还是人工胚胎中两个融合的(Steffann et al., 2014)。总之，胚胎分裂期进行着床前基因诊断意义较大而在囊胚期则不可靠 新发展 上述改变mtDNA遗传性的技术存在几个弊端：首先，卵母细胞捐献技术导致后代不会遗传母亲的核DNA。其次，囊胚期着床前基因诊断和绒毛膜取样前基因诊断可靠准确(Monnot et al.,2011) 近期的两个理论——原核移植和染色体纺锤体复合物移植都规避了这些问题。这两种方法都旨在将供体卵母细胞基因移植到一个没有细胞核和mtDNA的健康卵母细胞中。值得注意的是，原核移植是将来自双亲的受精卵母细胞的原核移植到受体去核受体卵母细胞中，而染色体纺锤体复合物移植则是移植供体卵母细胞的染色体纺锤体。核基因被移植到有功能的线粒体环境中，病理性mtDNA的复制被终止，因此胚胎可以正常发育(Poulton and Oakeshott,2012)。这些疗法旨在使所有细胞中的mtDNA突变量达到零，且父母双方的基因都可遗传给后代，解决了传统疗法的弊端。 预实验证明了这些技术的可行性(St John and Campbell,2010)。目前，没有方法可以避免供体mtDNA交叉转移，但这些技术都试图将基因交叉转移量控制在1%以下。通过不同检测限度比较研究检测出供体mtDNA交叉转移量范围在0.01和2%之间(Craven et al., 2010)，九个通过原核移植培育的人类胚胎中有五个的平均供体mtDNA交叉转移量是1.68%。另一些研究中，染色体纺锤体复合物移植出的胚胎在0.5-0.6%之间(Tachibanaet al., 2013)。人类核移植的交叉转移量是0.31% (Paull et al., 2013)。而恒河猴纺锤体移植是1% (Tachibana et al., 2009; Lee et al., 2012)。因此，胚胎中低水平的异质性基因不可避免。 这样极低含量的基因通常不能达到病理性阈值(Cravenet al., 2011)。瓶颈阶段的mtDNA可能导致下一代女性胚胎中的异质性基因扩增，不过近期报道显示这种交叉转移不会超过5%，不足以引起疾病。因此，这两种技术都是安全的(Samuels et al., 2013)。 现治疗的潜在问题 虽然这些在临床上使用的现代治疗在很大程度上被认为是足够安全的,但在关于人群接受治疗后mtDNA的表现上仍