《分析化学》第十二章 液相色谱法.pptVIP

怎样学习有机化学 第十二章 液相色谱法 liquid chromatography 第十二章 液相色谱法 第一节 概述 第二节 柱色谱法 第三节 平面色谱法 思考与练习 第一节 概述 色谱法(chromatography)又称层析法，是一种依据物质的物理化学性质的不同(如溶解性、极性、离子交换能力、分子大小等)而进行的分离分析方法。 一、 色谱法的产生和发展 二、 色谱法的分类 三、 色谱法的基本原理 一、 色谱法的产生和发展 俄国植物学家茨维特在1906年使用的装置，如图： 起分离作用的柱子叫色谱柱，其中的一相固定不动，称为固定相；另一相是携带试样混合物流过此固定相的流体(气体或液体)，称为流动相。 色谱法是一种分离技术 二、 色谱法的分类 三、 色谱法的基本原理 （一）.色谱过程 色谱法是一种分离技术，它是被分离物质分子在两相间分配平衡的过程。 以分离顺式和反式偶氮苯为例来说明色谱过程 小结：色谱过程 组分的结构和性质微小差异 与固定相作用差异 随流动相移动的速度不等 差速迁移 色谱分离。 两相及两相的相对运动构成了色谱法的基础；色谱过程就是组分的分子在流动相和固定相间多次“分配”产生“差速迁移”的过程。 （二）分配系数K 被分离组分以不同的程度分布在两相中，溶质既可进入固定相，也可进入流动相，这个过程叫分配 分配系数:在一定的温度和压力下，某组分在两相间的分配达到平衡时浓度（或溶解度）之比。 （三）保留值 某组分从开始洗脱到从柱中被洗脱下来所需要的时间称为保留时间(retention time)，通常用符号“tR ”表示。 某组分从开始洗脱到从柱中被洗脱下来所需要的流动相的体积称为保留体积(retention volume)，通常用符号“VR ”表示。 保留值是色谱法定性分析的基本参数。 （四）分配系数与保留值的关系 K值越大，移动速度越慢， tR越长，后出柱 K值越小，移动速度越快， tR越短，先出柱 混合物中各组分间的分配系数K相差越大，各组分越容易被分离 第二节 柱色谱法 一、 液-固吸附柱色谱法 二、 分配柱色谱法 三、 离子交换柱色谱法 四、 凝胶柱色谱法 一、 液-固吸附柱色谱法 （二）吸附剂 1.对吸附剂的基本要求是： (1). 具有较大的表面积和足够的吸附能力。 (2). 在所用的溶剂和洗脱剂中不溶解；不与试样各组分、溶剂和洗脱剂发生化学反应。 (3). 颗粒较均匀，有一定的细度，在使用过程中不易破碎。 (4). 具有较为可逆的吸附性，既能吸附试样组分，又易于解吸。 目前最常用的吸附剂是硅胶和氧化铝，其次是聚酰胺、活性炭，还有大孔吸附树脂等。 2.常用的吸附剂 硅胶：多孔性微粒，表面带有硅醇基，呈弱酸性。 原理:硅醇基(吸附中心)与极性基团形成氢键(吸附性),组分与硅醇基形成氢键(被吸附)的能力不同而分离。 应用:酸性和中性物质的分离，如有机酸、酚类、醛类. 硅胶 活度与含水量的关系： 含水量高，活度低。 活化： 加热至100℃左右，除去吸附水提高活度 分离效率：与其粒度及表面积等有关。 常用硅胶： 硅胶H，不含黏合剂 硅胶G，含煅石膏 硅胶GF254，含煅石膏和一种无机荧光剂，即锰激活的硅酸锌，在254nm紫外光下呈强烈黄绿色荧光背景。 氧化铝 种类 碱性氧化铝(pH9～10):适用于分离碱性或中性化合物 酸性氧化铝(pH5～4.5):适用于分离酸性化合物 中性氧化铝(pH7～7.5):适用于分离酸性、中性和碱性化合物 活性与含水量的关系 含水量高，活性级高，活度低 其它吸附剂 聚酰胺 是一类由酰胺聚合而成的高分子化合物 结构特点：存在许多酰胺键，可与酚类、酸类、硝基化合物、醌类等形成氢键。 活性碳： 属于非极性吸附剂，吸附能力强，适合于水溶性物质的分离 大孔吸附树脂： 不含交换基团，具有大孔网状结构的高分子吸附剂。用于皂苷及苷类化合物的分离 （三）流动相(洗脱剂) 1.对流动相的基本要求是： (1). 对试样组分的溶解度要足够大。 (2). 不与试样组分和吸附剂发生化学反应。 (3). 粘度小，易流动。 (4). 有足够的纯度。 2.溶剂的极性由弱到强的顺序： 石油醚环己烷四氯化碳苯甲苯乙醚氯仿乙酸乙酯正丁醇丙酮乙醇甲醇水 (四）被分离的物质 (1)烷烃系非极性化合物,一般不被吸附或吸附不牢固. (2)不饱和烃分子中双键越多或共轭链越长,其极性越强,被吸附力亦越强. (3)当形成分子内氢键时,被吸附力减弱. (4)同系物中,分子量越大,极性越小,被吸附力越弱. (5)基本母核相同的化合物,分子中官能团极性越大或极性官能团越多,则分子的极性越大,被吸附力越强. 常见官能团的极性由小到大的顺序： 烷烃烯烃醚类硝基化合物