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一名词解释 吸光度 是指光线通过溶液或某一物质前的入射光强度 与该光线通过溶液或物质后的透射光强度比值的对数，影响它的因素有溶剂、浓度、温度等等。吸光度用A表示A＝abc，其中a为吸光系数，单位L/(g·cm),b为液层厚度（通常为比色皿的厚度），单位cm ， c为溶液浓度，单位g/L盐析,扣除死时间后的保留时间。tR＝tR－t0tR：进样开始至出某组分峰所需时间，称保留时间 t0：进样开始至出空气峰所需时间，称死时间 外法 就是用标准品的峰面积或峰高与其对应的浓度做一条标准曲线,测出样品的峰面积或峰高,在标准曲线上查出其对应的浓度,这是最常用的一种定量方法泳动度指带电颗粒在单位电场强度的速度。单克隆抗体序列标签位点DNA片段定向插入到载体分子中的方案叫定向克隆。 比较基因组学:在基因组图谱和序列分析的基础上，对已知基因进行比较，了解基因的功能，表达和物种进化的学科。ε或EM表示 分配系数　粘粒吸附决定电位离子层带电后，靠静电引力吸引溶液中电性相反的离子聚其周围，这部分离子称反离子，形成反离子层。cDNA文库：将真核细胞内全部mRNA转录成cDNA并将双链cDNA（dscDNA）和载体连接，由此得到的cDNA克隆群体称为cDNA文库。 包含体：它是致密的不溶性蛋白和RNA的凝聚体，包含大部分的表达蛋白。genetic mapping）又称连锁图谱（linkage map），是通过测定重组率，确定用重组率表示的基因之间的相对位置。物理图谱（physical map）是利用各种分子标记确定片段间的连接顺序，以及遗传标志之间用千碱基（kb）或兆碱基（Mb）表示的物理距离。 ②重叠群的建立， 染色体被分解并完成测序后，需要组装，低分辨率物理图谱可以为组装提供标记。 制作低分辨率物理图谱，广泛使用序列标签位点（sequence tagged site, STS）。所谓的STS是在染色体上定位明确，且可用PCR扩增的单拷贝序列。 ③高分别率物理图谱的制作，重叠群克隆中的大片段通常要被分解成较小的片段，用BAC进行亚克隆后，才可被用来通过随机切割进行测序。由于亚克隆中的片段也需要组装，在分解大片段之前，需要制作大片段的高分辨率物理图谱。制作高分辨率物理图谱，可以采用多种不同的分子标记。（1）限制性片段长度多态性标记 （2）DNA重复序列的多态性标记 （3）单核苷酸多态性标记 ④序列测定 在制作高分别率物理图谱的基础上，就可以对BAC中插入的片段逐个进行测序。 ⑤基因定位 基因定位的一个基本方法是重组分析，若某致病基因和某个分子标记如微卫星DNA的重组率超过5%，说明二者不连锁，若重组率接近于零，说明该基因位于标记位点符近。 基因定位的另一个基本方法，是根据蛋白质结构的氨基酸序列，设计特异性的探针，通过分子杂交，筛选cDNA文库，这种方法称作功能克隆。 概述用分光光度法进行定量测定的常用方法和为减小测量误差应注意的问题 1. 吸光系数法（绝对法） 根据比尔定律A = εc l ，若 l 和吸光系数ε或E1%1cm已知，即可根据测得的A，求出被测物的浓度。 C = A / εl 通常ε和E1%1cm可以在手册或文献中查到 2. 标准曲线法 （1）配置一系列浓度不同的标准溶液。 （2）在测定条件相同的情况下，分别测定其吸光度。 （3）以标准溶液浓度为横坐标（不必考虑显色剂等引起的体积和浓度变化），以相应的吸光度为纵坐标，绘制A-C关系图。 （4）在相同条件下测出样品溶液的吸光度，从标准曲线上查出浓度。 3. 对照法 在同样条件下配置标准溶液和样品溶液，在选定波长处，分别测量吸光度，根据定律 A标=EC标l A样=EC样l 在同种物质、同台仪器及同一波长测定的条件下l 和E 均为定值，所以： 减小测定误差的方法 1. 选择合适的显色剂，使显色反应的灵敏度高、选择性好、显色产物稳定。 2. 通过条件试验，找出最佳的试剂加入量、酸度、温度和显色时间。并使样品与标准品在尽可能完全相同的条件下进行测定。 3. 设置合适的对照。 4. 通过加掩蔽剂和控制pH值，消除共存离子的干扰。 5. 尽可能在吸光度0.1(1.0范围内测定，以减小吸光度误差。A 0.1的溶液，尽量用摩尔吸光系数大的显色反应，在最大吸收波长处进行测定，吸收池厚度大一些，溶液可通过萃取、浓缩、增大取样量来增加吸光度。A 1.0的溶液，可通过稀释或用薄的吸收池来降低吸光度。 6. 减小仪器误差。用稳压器稳定电压以使入射光强度保持不变；吸收池厚度应一致，透光性好，不要用手摸透光面；吸收池与入射光线应垂