气相色谱定量方法及加标回收率的计算.ppt

气相色谱的定量方法加标回收率的计算 主讲：白明 本节的主要内容 色谱的定量方法 加标回收率的计算 色谱的定量依据 峰高（Height） 适用条件：峰高定性要求色谱柱效较高的条件下，半峰宽小于一定值或所有峰半峰宽均相等时。 峰面积（Area） 适用条件：峰面积一般不会随着外在条件的改变而改变，所以用峰面积定量在任何条件下都适用。 常见的几种定量方法 峰面积百分比法（PERCENT） 校正归一化法（NORM%） 外标法（ESTD） 内标法（ISTD） 外标百分比法（ ESTD%） 内标百分比法（ ISTD%） 峰面积百分比法（PERCENT） 峰面积百分比法，是指通过计算某一组分峰面积在所有组分峰面积总和中所占的比重（比例），来计算这个组分含量的方法。计算公式如下： 峰面积百分比法的适用范围 此定量方法在很多时候都较为粗略，若要获得较为准确的分析数据，需满足以下几点要求： 1.所有组分包括未知组分全部出峰，且全部分离； 2.杂质峰面积远小于测定组分峰面积，可以完全忽略； 3.杂质组分物化性质与测定组分物化性质相似程度接近，最好是同一类物质。 峰面积百分比法优缺点 优点： 对进样量无要求 无需校准，可根据峰面积直接定量 缺点 所有物质都要流出且被检测到 定量结果较为粗略 峰面积必须准确 本厂成品BDO纯度达99.8%，其中中含有的杂质组分如下： 谱图处理及结果计算 校正归一化法（NORM） 校正归一化法，是将所有组分峰面积校正后，按各组分在整体中所占的比例进行定量的结果。此定量方法比峰面积百分比法较为精确，计算公式为： 校正归一化法的适用范围 要进行校正归一化法进行分析，必须满足以下条件： 1.所有组分包括未知组分全部出峰，且全部分离； 2.在实际测定时各个组分的含量变化范围不能太大，以免影响整体测定结果； 3.未知组分峰面积远小于已知组分峰面积，可以完全忽略，若有未知组分的峰面积过大则不推荐使用。 校正归一化法优缺点 优点： 对进样量要求不严格 相比峰面积百分比法，可较准确地进行定量。 缺点 所有物质都要流出且被检测到 必须校正所有的峰 对灵敏度差异比较大的组分，可能在实际测定中会产生较大误差。 实例：粗DMO典型色谱图 结果计算 粗DMO中各组分含量wi(%)用下式计算： 外标法（ESTD） 外标法，是把已知浓度的标准样品和未知浓度的实际样品在相同的条件下单独进样，把得到的峰面积进行比较以求得待测组分含量的定量方法。计算公式如下： 外标法适用范围 要用外标法进行定量分析，则需满足以下条件： 1.要求色谱的稳定性必须非常好才行，否则会对测定直接产生影响； 2.由于外标法的结果与进样量的大小是直接相关的，所以只适用于测定较低含量的样品； 3.计算是按质量计算的，而进样是按体积进样的，所以有时得考虑密度的影响，尤其是溶剂与组分密度的差异比较大的时候。 外标法的优缺点 优点： 只对欲分析的组分峰做校正即可 无需所有组分均流出 缺点： 进样量必须准确 须定期对峰进行重新校正 内标法（ISTD） 内标法是将一定重量的纯物质作为内标物加到一定量的被分析样品混合物中，然后对含有内标物的样品进行色谱分析，分别测定内标物和待测组分的峰面积及相对校正因子，按公式和方法即可求出被测组分在样品中的百分含量。计算公式如下： 内标法使用要求 当配制校正因子测定用的对照溶液和含有内标物质的待测组分溶液使用同一份内标物质溶液时，则配制内标物质溶液不必精密称（量）取。 采用内标法定量时，内标物的选择是一项十分重要的工作。理想地说，内标物应当是一个能得到纯样的已知化合物，这样它能以准确、已知的量加到样品中去，它应当和被分析的样品组分有基本相同或尽可能一致的物理化学性质(如化学结构、极性、挥发度及在溶剂中的溶解度等)、色谱行为和响应特征，最好是被分析物质的一个同系物。当然，在色谱分析条件下，内标物必须能与样品中各组分充分分离。 内标物的选择标准 样品中不存在该物质 物理化学性质与待测组分相似，最好为同系物 与待测组分的相应灵敏度接近 不会与样品发生化学反应，且与样品能完全互溶 在待测组分附近流出，不得干扰到测定峰的出峰，且不能与测定峰的保留时间相差太远 可得到良好的、干净利落的色谱峰 其色谱性质稳定 内标法的优缺点 优点： 进样量要求不严格 只对欲分析的组分峰进行校正即可 因为内标峰与样品峰是同时流出的，所以比外标法更加准确，且受仪器稳定性影响小 缺点： 每次分析都必须加入内标物到样品中 分析和计算过程比较复杂，不容易掌握 外标百分比法（ISTD%）和内标百分比法（ESTD%） 外标百分比法和内标百分比法是在外标法和内标法的基础上，由