种子发芽和根伸长试验zhongjie.ppt

刘胜男 本方法可用于测定受试物对陆生植物种子萌发和根部伸长的抑制作用，以评定受试物对陆生植物胚胎发育的影响。 目 的 种子在含一定浓度受试物的基质中发芽，当对照组种子发芽率在65％以上，根长达2cm时，试验结束，测定不同处理浓度种子的发芽率和根伸长抑制率。 原 理 培养容器，受控环境生长箱，试验材料可选用小麦、水稻、大白菜、番茄、棉花等。 每一植物种子试验，至少应有6个不同的处理浓度。浓度以几何级数选择。每一处理浓度应设3次以上重复，每一重复至少15粒种子。发芽试验期间温度控制在(25±1) ℃，保持黑暗。 仪器和试验材料 用医用小镊子将15粒种子播种于土壤中，盖好好盖子，置于生化培养箱中25℃黑暗培养。 当植物对照芽长达20mm时，终止培养，取出发芽种子，测量根长、芽长、根数和发芽个数 置于烘干箱中40烘24h，测量平均生物量(分析天平)。 试验方法 数据处理 发芽势=在规定日期内正常发芽的种子数/供试种子总数 发芽率=种子发芽终止时全部正常发芽种子数/供试种子总数 对种子发芽进行计数,种子发芽标准为芽长3 mm。根长测量时选取最长根长的主根。 其中根长是指根和芽接点处到最长根尖的长度 芽长是根基点到芽尖的长度 数据处理 本测试适用于水溶性化学物质，如果受试物不溶于水，可用水溶性有机溶剂，如丙酮、乙醇、丙醇等作载体，获得试验要求的浓度。 发芽是指胚重新开始活跃生长。种子初生根的长度达0.5cm作为发芽的标准。 种子应大小一致，饱满度、等级相同。 注意事项 试验前，所有种子经2%双氧水浸泡10min后，分别用自来水和蒸馏水充分冲洗。 所有试验用的玻璃器皿和基质应清洁，无污染。试验中不准使用塑料培养皿。对照种子发芽率应大于65％。 本实验每处理重复3次 当且仅当根长和芽长均过3mm时，才认为是发芽成功。 种子发芽试验、植物根伸长抑制试验以及植物早期生长试验都是目前已经建立的高等植物毒理试验方法!这些试验通过考察植物在污染条件下根系发育的情况、生物量减少的程度以及种子发芽对污染物毒性效应的反应，对污染物的危害性进行诊断并对相应的生态风险作出评价。 供试材料 研究方法 所有的玻璃器皿使用前用 洗液浸洗，再用自来水冲洗干净，蒸馏水冲洗一遍，于烘箱120℃烘干备用。 根据麝香酮在污泥中的浓度为100mg/kg,设置麝香酮预实验浓度为0、0.5、10、20、和50mg/kg进行预备实验。 根据预备试验中小麦芽长和根长抑制率10%~50%的浓度设置麝香酮的正式试验浓度为0、0.5、10、20、30mg/kg。 采用土壤染毒法，将配制好的麝香酮-丙酮溶液投加到土壤中，待丙酮挥发干净，开始正式试验! 称取50g干土于90mm的培养皿中，调节水土比为1：5，用医用小镊子将15粒种子播种于土壤中，盖好盖子，置于生化培养箱中25℃黑暗培养,当小麦对照芽长达到20mm时，终止培养，取出发芽种子，测量根长、芽长、根数和发芽个数，然后置于 烘干箱中40℃烘24h，测量平均生物量（分析天 平）! 结果与分析 在所有试验浓度范围内，麝香酮污染对小麦的发芽率起促进作用，低浓度的麝香酮促进小麦芽长生长!随着浓度的增加，芽长抑制率逐渐增大! 与植物种子发芽有关的各种指标的敏感顺序为：根长根生物量芽长总生物量地上部生物量发芽率 * *