第8章-微生物遗传-2.ppt

感受态： 出现时间：只在细菌生长的某一时期出现；不同菌种的感受态出现在不同生长时期 Streptococcus pneumoniae的感受态出现在生长曲线中的指数期的中期；Bacillus的一些种则往往出现在指数期末及稳定期的初期。 感受态由细胞的遗传性决定，但同时也受环境因子的影响：cAMP、Ca2+等最明显。如用CaCl2 处理E. coli可以诱发其产生感受态。 感受态细胞的比例：当处于感受态高峰时，群体中呈感受态的细胞因菌种而不同. Bacillus subtilis不超过10~15% Streptococcus pneumonia和Haemophilus influenzae（流感嗜血杆菌）达到100% 转化DNA的最低浓度：在群体中含有15%感受态细胞时，0.1?gDNA/ml细胞悬液即可有效发生转化 菌种的复壮措施 纯种分离 菌落纯的分离方法（平板表面涂布法，平板划线分离法，琼脂培养基浇注法） 细胞纯的分离方法（分离小室进行单细胞分离，显微操纵器进行单细胞分离，菌丝尖端切割法进行单细胞分离） 通过宿主体内生长进行复壮（如Bacillus thuringiensis的复壮） 淘汰已衰退的个体（采用比较激烈的理化条件进行处理，以杀死生命力较差的已衰退个体） 几种常用菌种保藏方法的比较 一、菌种的衰退与复壮 1）从衰退的菌种群体中把少数个体再找出来，重新获得具有 原有典型性状的菌种。 2）有意识地利用微生物会发生自发突变的特性，在日常的菌种 维护工作中不断筛选“正变”个体。 大量群体中的自发突变 菌种的复壮： a）纯种分离； b）通过寄主体进行复壮； 菌种衰退的特点： * * 第8章 微生物遗传 基因的水平转移： 个体A 个体B 遗传物质 通过基因的重组可使后者（个体B）及其后代 的性状发生改变。 细菌所特有的基因重组形式，有别于一般有性过程中 的亲本和其后代之间遗传信息的垂直传递形式。 细菌基因的水平转移和重组 本节重点：三种基因水平转移方式及其应用 水平基因转移（Horizontal gene transfer, HGT） ，不仅发生在不同的微生物细胞之间，而且也发生在微生物与高等动植物之间。 生物间基因的转移和交换是普遍存在的，是生物进化的重要动力之一。  第3节 细菌基因的水平转移和重组 细菌的三种水平基因转移形式 接合（Conjugation） 转导（Transduction） 转化（Transformation） √ 接合 (conjugation)： 细胞与细胞的直接接触（由F因子介导） 转导(transduction)： 由噬菌体介导 自然遗传转化(natural genetic transformation)： 游离DNA分子 + 感受态细胞 一、细菌的接合作用(conjugation) 通过细胞与细胞的直接接触而产生的 遗传信息的转移和重组过程 1.实验证据 1946年，Joshua Lederberg 和Edward L.Taturm 细菌的多重营养缺陷型杂交实验 中间平板上长出的原养型菌落 是两菌株之间发生了遗传交换 和重组所致！ 证实接合过程需要细胞间的直接接触的 “U”型管实验（ Bernard Davis，1950 ） 接合： 供体与受体细胞直接接触，借性菌毛传递DNA，在受体细胞中发生交换、整合，使之获得供体菌的遗传性状的现象，称为接合。通过接合而获得新性状的受体细胞就称接合子。 2. 机制 (大肠杆菌的接合机制) 接合作用是由一种被称为F因子的质粒介导 F因子的分子量通常为5×107，上面有编码细菌产生性菌毛 （sex pili）及控制接合过程进行的20多个基因。 含有F因子的细胞：“雄性”菌株（F+），其细胞表面有性菌毛 不含F因子的细胞：“雌性”菌株（F-），细胞表面没有性菌毛 第3节 细菌基因的水平转移和重组 细菌的三种水平基因转移形式 接合 转导 转化 √ 二、细菌的转导（transduction） 由噬菌体介导的细菌细胞间进行遗传交换的一种方式： 一个细胞的DNA通过病毒载体的感染转移到另一个细胞中 能将一个细菌宿主的部分染色体或质粒DNA 带到另一个细菌的噬菌体称为转导噬菌体 细菌转导的二种类型： 普遍性转导 局限性转导 A B [-] [-] Try+his+ Try-his+ Try+his- 定义：以温和噬菌体为媒介，将供体细胞的DNA片段携带到受体细胞中，通过交换与整合，从而使后者获得前者部分遗传性状的现象，称为转导。获得新遗传性状的受体细胞，称转导子。 1、普遍性转导（generalized transduction） 噬菌