体外法研究猪后肠道对芳香族氨基酸的发酵特性.PDF

微生物学报 Acta Microbiologica Sinica 2016, 56(11): 1786-1793 /actamicrocn DOI: 10.13343/ki.wsxb Research Paper 研究报告 体外法研究猪后肠道对芳香族氨基酸的发酵特性 * 马梅蕾 ，何香玉 ，朱伟云 南京农业大学消化道微生物研究室，江苏省消化道营养与动物健康重点实验室，江苏 南京 210095 摘要： 【目的】采用体外发酵技术探究芳香族氨基酸在猪后肠的发酵特性。【方法】以杜×长×大育肥 o 猪回肠、盲肠和结肠食糜为接种物，接种于10 mmol/L单一氨基酸的培养基中，37 C培养24 h ，测定4 、 8、12、16和24 h 的产气量(GP) ，采集0 h和24 h样品，测定样品中的氨氮(NH -N)和微生物蛋白(MCP)浓 3 度，利用变性梯度凝胶电泳技术(DGGE)和Real-time PCR定量技术分析体外培养中参与代谢特定氨基酸 的细菌组成及数量。【结果】不同芳香族氨基酸的发酵液中NH 3 -N 和MCP 浓度存在极显著差异 (P 0.01) ，肠段对GP 、NH 3 -N和MCP影响极显著(P 0.01) ，且芳香族氨基酸与肠段对GP 、NH 3 -N和 MCP浓度均存在交互作用(P0.01) 。定量PCR表明，芳香族氨基酸和肠段均显著影响发酵液中总菌数量 (P0.05) 。DGGE分析显示，同一肠段不同芳香族氨基酸组的细菌群落结构具有高度的相似性，其中回 肠Phe组和Tyr组、结肠Tyr组和Trp组的相似性分别高达87.9%和80.5% ，盲肠和结肠微生物香农指数变化 显著(P0.05) 。【结论】不同芳香族氨基酸的肠道代谢菌具有差异性，与Trp和Phe相比，Tyr 的盲肠和结 肠代谢菌多样性较低，与Trp和Tyr相比，Phe更多地合成菌体；特定芳香族氨基酸的不同肠道发酵去向 不同，与回肠和盲肠比，结肠中芳香族氨基酸更多地合成菌体。 关键词：体外发酵, 肠段, 芳香族氨基酸, 细菌菌群 [1] 芳香族氨基酸(Aromatic amino acid, AAA)是 基酸浓度过高或过低也将引起机体代谢的紊乱 。 一类含有芳香环的α - 氨基酸，包括苯丙氨酸 近年来，国内外对氨基酸肠道代谢的研究，主要 (Phe)、酪氨酸(Tyr)和色氨酸(Trp) ，其中苯丙氨酸 集中在小肠肠壁细胞的吸收利用和肠道细菌对氨 [2] [3] 和色氨酸是人体的必需氨基酸，在生命活动中起 基酸的发酵 。Dai等 通过体外培养和继代研究 着极其重要的作用。有报道指出芳香族氨基酸能 发现猪小肠( 十二指肠、空肠和