大蒜素诱导SGC7901细胞凋亡及机制的研究.pdfVIP

五、附录 综j苤……………………………………………………… 参考文献…………………………………………………………………………64 在学期间科研成绩………………………………………………………………68 致谢………………………………………………………………………………………………………“69 个人简介…………………………………………………………………………70 ·中文论著摘要· 大蒜素诱导SGC．7901细胞凋亡及机制的研究 ．^_1．-J- 刖 吾 恶性肿瘤己成为人类主要死亡因素，并有进一步增高的趋势。其中全球每年 约有760，000人被诊断为胃癌。早期胃癌发病隐匿，或没有特殊的临床症状，所 以，当胃癌因有症状而被诊断时，通常是胃癌晚期。胃癌的致病因素还不清楚， 其中以下因素将增加胃癌的发病危险：年龄超过55岁，男性，高盐饮食，高硝酸 盐类饮食，低维生素饮食，癌前病变，如恶性贫血、萎缩性胃炎、胃黏膜肠化生、 李弗劳明综合征及有胃肠恶性肿瘤家族史等因素均会增加胃癌的发病风险；相反， 粗粮饮食、多食蔬菜、水果、高纤维素饮食将降低胃癌发病率。胃癌的治疗方法 主要包括手术、放疗、化疗等，迄今为止，手术一直是胃癌的第一选择，化疗对 胃癌的作用有限。胃癌的预后较差，胃癌严重威胁人类健康。所以，早期诊断， 预防和治疗胃癌迫在眉睫。 近年来，从传统中药和天然药物中寻找和提取防治肿瘤的有效成分已成为治 疗肿瘤的希望和新途径。大蒜素是大蒜中主要生物活性成分的总称，为多种烯丙 基有机硫化合物复合体，主要成分含50％-80％的二烯丙基三硫化合物(DADS)、 J．Cavallito最早于1944年从实验室 20％-50％的二丙烯二硫化合物(DAS)。Chester 中分离提纯，现代药物化学研究证明，大蒜素中所特有的有机含硫化合物，对许 多革兰阴性菌和革兰阳性菌以及真菌有很强的杀菌作用。近年来国内外的研究发 现，长期摄入大蒜可以降低恶性肿瘤(尤其是胃肠道和口腔恶性肿瘤)的发生率， 多项调查发现居民食用大蒜的量与胃癌的发病率、胃癌死亡率呈显著的负相关。 动物实验和离体细胞试验中也证实大蒜及其提取成分具有良好的抗癌、防癌作用。 关于大蒜素治疗胃癌机制方面的研究，目前认为大蒜素能阻断致癌物的合成， 抑制致癌物的活化并有抗突变、抗畸变作用。本科室前期研究表明，大蒜素可以 B1在细胞内的表达并促 促进微管解聚，可提高促成熟因子(MPF)的重要成份cyclin 进其向核内转移，使细胞周期阻滞于M期，即大蒜素治疗胃癌与大蒜素参与细胞 周期调控有关。但有关大蒜素诱导胃癌细胞凋亡及其机制，尚有待深入探讨。 顺铂是最广泛应用一线抗肿瘤的化疗药物。由于顺铂的临床疗效与其应用剂量 相关，大剂量应用时的临床毒副作用较大，限制了其临床应用，其疗效仍有待于 提高。提高顺铂的抗肿瘤疗效，是临床抗肿瘤治疗面临的实际问题。目前，在临 床化疗中，常通过联合用药，以提高临床治疗疗效。那么，大蒜素联合顺铂能否 发挥协同作用，对胃癌细胞有何影响，有待探讨。 亡的作用，探讨大蒜素诱导胃癌SGC．7901细胞凋亡机制，研究大蒜素与顺铂联 合作用对胃癌SGC．7901细胞凋亡的影响及机制。 材料与方法 l、MTT法检测SGC．7901细胞活力。 2、倒置显微镜下观察SGC．7901细胞形态。 3、透射电镜检测大蒜素作用后SGC．7901细胞形态学变化。 4、罗丹明123与碘化丙啶染色，荧光显微镜观察SGC．7901细胞形态学影响。 5、膜联蛋I刍(Annexin．V)和碘化丙啶(PI)染色流式细胞术(flowcytometry， FCM)定量检测细胞凋亡率。 membrane 6、罗丹明123染色，流式细胞术检测线粒体膜电位(mitochondrial potcntial(Arm))。 7、细胞免疫组化及western．blot检测蛋白表达。 8、real．timePCR检测mRNA表达。