疫苗研发技术路线.pptVIP

技术路线 质粒构建——分子克隆 质粒构建——分子克隆 原核表达、蛋白纯化 间接ELISA、免疫组化、western blot 淋巴细胞增殖试验 行为学试验（水迷宫） * 质粒构建 表达、纯化 靶组织 免疫模型动物 真核细胞 表达试验 淋巴细胞 增殖试验 ELISA 脾细胞 血清 免疫小鼠 Western Blot 免疫组化 行为学 实验 淋巴细胞 增殖试验 ELISA 脾细胞 血清 真核细胞 表达试验 综合评价，决定是否进入大动物试验或临床前试验 原理 原理 乳糖操纵子 目的基因 his his his his his his 乳糖操纵子 目的基因 his his his his his his （一）质粒的复制 （二）目的基因的表达 （三）蛋白的纯化 目的蛋白中组氨酸上的咪唑环与镍柱结合，其他蛋白不结合；再用高浓度的咪唑组氨酸置换下来，得到纯化的目的蛋白。 IPTG +DAB 棕色物质 +ECL 发光 FITC 荧光显微镜 绿色荧光 T淋巴细胞 不增殖 大量增殖 未受刺激 加入非抗原性刺激物；或特异性抗原性刺激物 MTS比色 线粒体脱氢酶 *