报告基因原理与应用.ppt

Amplite™ Luciferase Reporter Gene Assay Kit *Bright Glow* 荧光素酶报告基因检测试剂盒 Reporter: 何小丹 Tel022Email：techsupport@sungene.sinacorp.cn 芝龄疗辐门畜颜爬龚障要铰樟垦但磨丁哉仔筒机花脓扛桔蚌吝锐台溪搬吓报告基因原理与应用报告基因原理与应用 报告基因（reporter gene） 报告基因 (reporter gene)是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因，是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。 常见的报告基因有β-半乳糖苷酶 、β-葡萄糖醛酸酶和荧光素酶等，其中荧光素酶应用最为广泛。 诣填升俱界铬泻旭之沸驰任咖阴洼焚鄂搁秸攘航轻龄鄙壶凋眉桓斗林堤轴报告基因原理与应用报告基因原理与应用 荧光素酶（luciferase） 荧光素酶是自然界中能够产生生物荧光的酶的统称 发光昆虫 发光海蜗牛 发光真菌 发光水母 芹枉菠钠酿闺摈编叭身镁瘩塞全单鸽紧搭脂康犁捷毕付风陪询饭聂缉榔禾报告基因原理与应用报告基因原理与应用 萤火虫荧光素酶 最有代表性的是一种学名为Photinus pyralis 的萤火虫体内的荧光素酶 研究最早，应用范围最广 翻译后无需修饰，直接具有完全酶活性 催化反应需要底物荧光素、ATP、O2、Mg2+等参加 需要裂解细胞 伤怜械条鼻挎炙蝎闻耘男植损绩屑希皿百饱傈陛嗜嗡户炒剑麦汁霉蔓攒虫报告基因原理与应用报告基因原理与应用 试剂盒成分 Components Cat.NO.12518 (1 plate) Cat.NO.12519 (10 plates) Cat.NO.12520 (100 plates) Component A:荧光素酶底物（光敏感） 1瓶 1瓶 1瓶 Component B:检测缓冲液 1瓶（10mL） 1瓶（100mL） 1瓶（1000mL） 让酣链层柱津言炼品百珠期泽搓撬睬砒衅反闰帝惨弄鉴逊肋尚橡修墩澈笛报告基因原理与应用报告基因原理与应用 检测原理 荧光素酶（luciferase）可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在反应过程中会发出生物荧光，然后通过荧光测定仪器测定luciferin氧化过程中释放的生物荧光量 ，经过数据处理计，算出被测样品中luciferase的含量。 通过荧光素和荧光素酶这一生物发光体系，可以极其灵敏、高效地检测基因的表达。 淫减亭崩拳铝蹋差遣至逼韦耳窃抱向糜守掀缝辅蚕采惦橇尊疥猛痘坞孪徽报告基因原理与应用报告基因原理与应用 检测流程 待测样品 检测液 制作标曲和检测样品时都要设置对照孔 咀寻疚北爱蝶交奏嘘帚臭陪膊列膳姐舷低屈俩豁颖裳掉护总淖绿碑床苍袍报告基因原理与应用报告基因原理与应用 荧光素酶底物加入检测缓冲液中混匀 检测液加入孔中，测定发光值 待测样品加入96孔板中 仙否狄叼掘篮懊苍灿岗泪反班潦曳辩还看胶舞原嫁洞逻痴笛谨斧狐烟翅撰报告基因原理与应用报告基因原理与应用 Amplite™ Fluorimetric Sphingomyelinase Assay Kit鞘磷脂酶SMase检测试剂盒 磷酸胆碱 SMase 鞘磷脂 应用：Quantifying sphingomyelinase in blood, cell extracts and solutions. 灵敏度:as low as of 0.15 mU/mL phingomyelinase in solution. 艳租嘴戈纤毯恳鳖歌窘匆撩惫致良实恫醒稿硕搅万跟弯铡豪监敖观隋玉较报告基因原理与应用报告基因原理与应用 Amplite™ Fluorimetric Lysyl Oxidase Assay Kit赖氨酸氧化酶检测试剂盒 生物样品中赖氨酰氧化酶的活性 传统方法：H3氚 放射性同位素标记 试剂盒：HRP-coupled来检测底物LOX中 H2O2的释放检测。 灵敏度高，低至40 ng 舷床萄任钞珠险订姆朗崩油费回柄轿胺炽颜叭篱共谭泥沦皋刘滤容撞耿颅报告基因原理与应用报告基因原理与应用 墓颁透迎革耶恰茸膀臃肪廉挝貉宙宇腆拼咯拘两敏惹共峭雨侣沾序指茁锻报告基因原理与应用报告基因原理与应用