结肠癌细胞裸鼠皮下移植瘤生长情况的影响.PDFVIP

·５８４ · 医学研究生学报 ２０１７年６月 第３０卷 第６期　 Ｊ Ｍｅｄ Ｐｏｓｔｇｒａ，Ｖｏｌ．３０，Ｎｏ．６，Ｊｕｎｅ，２０１７ 论　 　 著 （基础研究） ＳｕｒｖｉｖｉｎｓｈＲＮＡ⁃ＡＰＣ双基因共表达慢病毒载体对 ＨＴ⁃２９ 结肠癌细胞裸鼠皮下移植瘤生长情况的影响 袁禧先，温　 超，曹　 雅，杜井峰，程　 开，朱艳丽，段厚羽 　 　 ［摘要］　 目的　 在转录后水平进行干预的ＲＮＡ干扰技术在多基因治疗中的应用越来越广泛。 文中旨在构建人 ＨＴ⁃２９ 结肠癌细胞裸鼠皮下移植瘤模型，通过联合ＲＮＡｉ和外源性补充的方式研究Ｓｕｒｖｉｖｉｎ ｓｈＲＮＡ⁃ＡＰＣ双基因共表达慢病毒载体对 结肠癌裸鼠移植瘤生长情况的影响。 　 方法　 选取３５只裸鼠随机数字表法分为５组，即Ｓｕｒｖｉｖｉｎ ｓｈＲＮＡ⁃ＡＰＣ双基因组、Ｓｕｒ⁃ ｖｉｖｉｎ ｓｈＲＮＡ组、ＡＰＣ组、空载组和空白组，每组７ 只；将已经构建好的处于对数生长期的双基因共表达Ｓｕｒｖｉｖｉｎ ｓｈＲＮＡ⁃ＡＰＣ、 ６ × Ｓｕｒｖｉｖｉｎ ｓｈＲＮＡ及ＡＰＣ稳转株，空载稳转株，ＨＴ⁃２９结肠癌细胞（均为２ １０ ／ ｍＬ）分别注射至５组裸鼠左前腋下成瘤，构建人 ＨＴ⁃２９结肠癌细胞裸鼠皮下移植瘤模型；通过测量瘤体体积、重量，检测移植瘤生长抑制率，Ｒｅａｌ ｔｉｍｅ ＰＣＲ检测移植瘤组织 ｓｕｒｖｉｖｉｎ ｍＲＮＡ 的表达，免疫组化检测Ｓｕｒｖｉｖｉｎ蛋白的表达，ＴＵＮＥＬ检测凋亡情况。 　 结果　 与空白组比较，ＡＰＣ组、Ｓｕｒｖｉｖｉｎ ｓｈＲＮＡ组、双基因组移植瘤平均体积、平均重量均减少（Ｐ＜０．０５）；与空载组比较，ＡＰＣ组、Ｓｕｒｖｉｖｉｎ ｓｈＲＮＡ组、双基因组平均体 积、平均移植瘤重量亦减少（Ｐ＜０．０５），而体积抑制率、瘤重抑制率均增加（Ｐ＜０．０５）；与双基因组比较，ＡＰＣ组、Ｓｕｒｖｉｖｉｎ ｓｈＲＮＡ 组移植瘤平均体积、平均重量均增加（Ｐ＜０．０５）。 与空白组和空载组相比，ＡＰＣ组、Ｓｕｒｖｉｖｉｎ ｓｈＲＮＡ组、Ｓｕｒｖｉｖｉｎ ｓｈＲＮＡ⁃ＡＰＣ双 基因组移植瘤组织Ｓｕｒｖｉｖｉｎ ｍＲＮＡ和蛋白表达相对含量明显降低（Ｐ＜０．０５）；与Ｓｕｒｖｉｖｉｎ ｓｈＲＮＡ组、ＡＰＣ组相比，双基因组移植 瘤组织Ｓｕｒｖｉｖｉｎ ｍＲＮＡ和蛋白表达相对含量亦明显降低（Ｐ＜０．０５）。 与空白组裸鼠移植瘤组织结肠癌细胞凋亡指数［（９．８９± ０．３１）％］比较，ＡＰＣ组、Ｓｕｒｖｉｖｉｎ ｓｈＲＮＡ组、双基因组［（３１．１９±１．７９）％、（３３．６４±２．０３）％、（５６．７２±３．１７）％］明显升高（Ｐ＜０．０５）， 而ＡＰＣ组、Ｓｕｒｖｉｖｉｎ ｓｈＲＮＡ组、双基因组亦较空载组［（１０．０６±０．４３）％］明显升高（Ｐ＜０．０５）；与Ｓｕｒｖｉｖｉｎ ｓｈＲＮＡ组、ＡＰＣ组相比， － Ｓｕｒｖｉｖｉｎ ｓｈＲＮＡ ＡＰＣ双基因组移植瘤组织癌细胞凋亡指数明显升高（Ｐ＜０．０５）。 　 结论　 Ｓｕｒｖｉｖｉｎ ｓｈＲＮＡ⁃ＡＰＣ双基因共表达 慢病毒载体能够使Ｓｕｒｖｉｖｉｎ基因的表达水平降低，促进结肠癌细胞的凋亡，抑制移植瘤的生长，且优于单个基因的影响。 　 　 ［关键词］　 皮下移植瘤；双基因共表达慢病毒载体；Ｓｕｒｖｉｖｉｎ ｓｈＲＮＡ；ＡＰＣ；ＨＴ⁃２９ 　 　 ［中图分类号］　 Ｒ７３５．３５　 　 　 ［文献标志码］　 Ａ　 　 　 ［文章编号］　 １００８⁃８１９９（２０１７）０６⁃０５８４⁃０７ 　 　 ［ＤＯＩ］　 １０．１６５７１／ ｊ．ｃｎｋｉ．１００８⁃８１９９．２０１７．０６．００６ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆｓｕｒｖｉｖｉｎｓｈＲＮＡ⁃ＡＰＣｄｏｕｂｌｅｇｅｎｅｃｏ⁃ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｎｔｉｖｉｒａｌｖｅｃｔｏｒｏｎｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓｘｅｎｏｔｒａｎｓｐｌａｎｔ⁃ ｅｄ ｔｕｍｏｒ ｏｆ ｈｕｍａｎ ＨＴ⁃２９ ｃｏｌｏｎ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｉｎ ｎｕｄｅ ｍｉｃｅ １ ２ ２ １ １ １ ２ ＹＵＡＮ Ｘｉ⁃ｘｉａｎ ，ＷＥＮ Ｃｈａｏ ，ＣＡＯ Ｙａ ，ＤＵＪｉｎｇ⁃ｆｅｎｇ