一个水稻持绿突变体的鉴定及其基因精细定位.pdfVIP

andGene ofa Identification Fine--Mapping RiceMutant Stay-Green SunYin Cang ADissertation to Normal Submitted University Zhejiang FuWlllmentofthe forthe InPartial Requirement ofScience ofMaster Degree Supervisedby ProfessorunMa Boj of Normal ChemistryLife College Seience，ZhejiangUniversity， Jinhua，321004，China May，2013 一个水稻持绿突变体的鉴定及其基因精细定位 摘要 叶绿素是植物进行光合作用的重要色素，在光合作用的能量捕获及能量传递 中起着重要的作用。本课题研究的材料是由粳稻中花11品种经过丫射线辐射得 到的一个可遗传的持绿突变体，暂命名D101。本课题通过水稻持绿突变体的表 型鉴定、水稻持绿突变体的遗传分析及其基因精细定位和水稻持绿突变体的高通 量重测序及候选基因分析三方面进行研究。研究结果如下： 1．表型鉴定：大田播种后，45天时，发现突变体水稻D101的叶片的绿色 要深，突变体D101的叶绿素a含量相对于野生型水稻中花1l的叶绿素含量显 著性提高；直到90天成熟时，表现极显著性提高。叶绿素b的含量和类胡萝I- 素的含量至90天成熟时，表现极显著性提高。农艺性状调查也发现突变体D101 的千粒重显极显著提高。细胞及亚细胞结构分析中，石蜡切片野生型中花1l和 突变型D101在结构上没有明显的区别，扫描电镜发现野生型中花ll的气孔关 闭的时候，突变型D101的气孔处于打开或半打开的状态。透射电镜发现突变体 D101的剑叶的细胞上的叶绿体上充满淀粉粒，而野生型中花11颖壳的细胞的叶 绿体则充满淀粉粒。 2．遗传分析及其基因精细定位：通过对中花llxDl01杂交F2代群体大田调 查作遗传分析，发现控制该持绿性状的基因是单基因控制的。对中花11×巴香占 杂交F2代群体的定位群体大田调查取样后，用均匀分布在12条染色体上的亲本 间的多态引物，进行基因初步定位，最后定位在1号染色体上。扩大群体后，并 设计多态引物，精细定位在分子标记ID21．RaMll860之间，约525kbp。 3．高通量重测序：通过对野生型中花11和突变体D101进行高通量重测序， 分别得到野生型中花11和突变型D101的12条染色体的基因组全序列，通过软 件比对，发现在突变体的1号染色体上有个大约88kbp的大片段缺失，与精细定 位的位点相吻合，且目前正在对缺少片段的序列进行分析，预测后选基因。 关键字：水稻；持绿突变体；叶绿素；基因精细