含油土壤中生物破乳菌的分离纯化及筛选.pdfVIP

VoL 10 No.33 Nov.20 1O 科学技术与工程 第 10 替第33 期 2010 年 11 月 1671一1815(2010)33-8128-03 Science Technology and Engineering @ 2010 Sci. Tech. E咿移 生物技术 含油1二壤中生物破乳菌的分离纯化及筛选 刘庆旺宋丽娜* 范振忠贺梦琦 (东北石油大学石油主程系，大庆 1ω318) 摘部 以大庆油田长期受石油污染的土壤为生物破轧菌筛选来源，经菌种的定向培养及分离纯化得到了菌种的单菌落，配 置含水40% 稳定时间大于 100 h 的 W/O 型模拟乳状液，对含油土壤培养法培养得到的9 种菌进行模拟乳状液破乳实验，筛选 得到了破乳率大于85% 的两种生物破乳筒。 关键间含油土壤 生物破轧前 生物破轧剂 乳状液 中附法分提号 Q939.99; 文献标志吗 A 生物破乳剂是指由生物破乳商经筛选、发酵等 油平板培养基，跟包营养琼脂培养慕。 生化处理过程得到的具有破乳能力的表丽惰性物 1.2 实验仪器 实翰用仪器有手提式压力燕、汽灭商消毒锅，数 质。生物破乳剂凭借其商效性和环保性成为同内 跟电热阳温培养楠，卧式恒温撮葫箱，趟净化工作 外研究的热点，它在水油分离、油污分离、去除等领 台，但跑水梅箱，容声冰箱，高分辨电子天平，精密 域的研究开发和应用前景十分广阔[1] 。针对生物 酸股计，生物显微镜，控温高速搅拌器。 破乳菌的分离纯化及筛选过程进行研究，探索出更 加简便、准确及有般的从长期受石油污染的土壤中 2 实验方法 筛选出具有较强脏乳能力的菌种的方法，为生物破 乳剂的大规模工业生产及应用票定禁础。 2.1 含油土壤菌种的分离 1 材抖与仪器 取 IOg 含油土壤，在火焰旁迅边放入装有 90 mL无菌成的带小破璃珠的无菌三角瓶内，充分 1. 1 ~也验材料 振荡20 min 将菌分散，按 10 俯梯度稀膺法[2] 稀释 后，将菌悬液涂布于营养琼脂培养基上，同一稀释 (1)菌种来耀:菌种取自大庆油田长期受石油 掖做三个平行样，置于 37t:恒蹦培养箱中培养 、污染的土壤，去梯表屁阳光直射土壤，取5 cm 以下 72 ho 土壤(10-15) g ，迅速装入靡口瓶中，取回放入4吃 2.2 含油土壤生物破轧菌的定向培养 冰箱保藏。 (1)单/双碳掠培养法:用移液管吸取稀梅 10 (2) 培养基:营养琼脂培养基，双碳源培养基， 倍的菌悬液 10 mL，分别加入单踹源掖体培养基和 单碳源培养基，斜酣保藏培养基，血平极培养基，原