高效pdx1;insulin双报告基因载体的构建及其初步应用.docVIP

高效Pdx1/insulin双报告基因载体的构建及其初步应用 叶玲玲1，李世崇1，孙海燕2，蓝三春3，陈昭烈1，王启伟1 (1军事医学科学院生物工程研究所，北京市 100071；解放军307医院，2口腔科，3造血干细胞移植科，北京市 100071) 引用本文：叶玲玲，李世崇，孙海燕，蓝三春，陈昭烈，王启伟. 高效Pdx1/insulin双报告基因载体的构建及其初步应用[J].中国组织工程研究，2017，21():1903-1908. DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.2017.12.017 ORCID: 0000-0003-0430-3802(王启伟) 文章快速阅读： 文题释义： Pdx1(pancreatic and duodenal homeobox1)：即胰十二指肠同源盒1，又称胰岛素启动因子1(IPF-1)。Pdx1在胰腺的发育(包括胰岛β细胞的成熟)以及十二指肠的分化中具有重要作用。胚胎发育过程中Pdx1 首先表达在前肠后部的内胚层，随后表达Pdx1的内皮细胞发育成胰芽，进而发育成胰腺包括外分泌部、内分泌部以及导管细胞。研究表明Pdx1纯合缺失小鼠可以出现早期胰芽发育受阻，导致胰腺发育不全，出生后不久即死于高血糖血症。 诱导多能干细胞：是由日本学者Takahashi和Yamanaka首先建立的。体外采用4个关键性因子将小鼠成纤维细胞重编程为胚胎干细胞样细胞。诱导多能干细胞避免了胚胎干细胞所遇到的伦理道德问题，而且由于来源自体细胞，因此不存在自身移植免疫排斥反应。诱导多能干细胞具有自我更新和多向分化的潜能，在再生医学、疾病模型和药物筛选中具有重要作用。 β细胞分化是一个复杂的过程。 目的：构建高效Pdx1/insulin双报告基因载体，探讨其实时监测诱导多能干细胞向胰岛β细胞分化中关键性基因表达的可行性。 β细胞；诱导分化；国家自然科学基金 主题词： 多能干细胞；胰岛素；基因, 报告；组织工程 基金资助： 国家自然科学青年基金项目 Construction of a high efficient pancreatic duodenal homeobox 1/insulin dual-reporter vector and its preliminary application Ye Ling-ling1, Li Shi-chong1, Sun Hai-yan2, Lan San-chun3, Chen Zhao-lie1, Wang Qi-wei1 (1Institute of Biotechnology, Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100071, China; 2Department of Stomatology, 3Hematopoietic Stem Cells Transplantation Center, the 307th Hospital of Chinese PLA, Beijing 100071, China) Abstract BACKGROUND: Islet beta cell replacement therapy is one of the most promising approaches for treating type 1 diabetes mellitus. However, its large scale application is hampered by a shortage of islet beta cells for transplantation. Pluripotent stem cells are one of ideal seed cells for islet beta cell replacement therapy, but pancreatic beta-cell differentiation is time-consuming and labor-intensive. OBJECTIVE: To construct a high efficient pancreatic and duodenal homeobox 1 (Pdx1)/insulin dual-reporter vector and to monitor the key genes expression during pancreatic beta-cell differentiation from pluripotent stem cells. METHODS: In order to construct a high efficient Pdx1/