脊髓损伤动物模型的制作.pdfVIP

方 法 2559。随机分为3组：对照组(N=10)，脊髓半损伤组(N=10)， 脊髓全损伤组(N=10)。手术过程中，对所有实验大鼠使用同一 把自制的2mm切割刀具，以确保脊髓损伤标准一致。同时，脊髓 半损伤组的损伤侧随机确定，避免由于术者手术习惯产生误差。 分别于术后第一周内每日、第2、3、4、5、6、7、8周等14个时间点， 将各组实验动物置于平面场地爬行，按照BBB评分标准观察、分 别记录动物双后肢运动功能恢复情况。由于大鼠昼夜活动差异， 所有观察均在晚8时进行。术后8周取两种模型中BBB评分接 近平均得分的大鼠各一只，过量麻醉处死动物，4％多聚甲醛常规 灌注固定，取材置于30％蔗糖溶液中4C脱水过夜，恒冷箱连续矢 组织形态学变化。实验记录了脊髓全横断切除组、单纯椎板磨除 的对照组在术后不同时间左、右两侧肢体的运动功能恢复情况和 脊髓半横断切除组在术后不同时间损伤侧和损伤对侧的运动功能 恢复情况，进行BBB评分，得到6组BBB评分结果。使用Kolmog- OIOV—Smimov方法检验所得数据的分步特性，结果显示术后任何 时间点各组的BBB数值符合近似正态分布；在此基础上，对术后 不同时间点各组的BBB数值，使用ANOVA方法进行统计分析： 一．以BBB为观察值，探讨各组间，不同观察时间两个因素，其均 of 数的差异是否有显著差别(UnivariateVariance)；如果 Analysis Student—Newman—Keuls 有则进一步进行SNK MultipleRange检 验(q检验)将6组的BBB评分两两分别比较；二，各个数据组中， 不同观察时问BBB是否有显著差异(One—Way—ANOVA)；如果 Student—Newman—Keuls 有则SNK MultipleRange检验(q检 验)将各个观察时间BBB两两分别比较，并作图，观察出脊髓功能 ·2· 随时间的变化情况。 结 果 of 6组BBB评分结果Univariate Variance分析有显著 Analysis 性差异；同时，除全横断摸型、对照组组左侧BBB评分和右侧BBB 评分之f可元显著性差异外，其余各组间存在显著差异。脊髓半横 断切除实验组的损伤侧BBB，术后l、2、3、4、5、6周各个相临观察 点之间BBB有显著差异，术后1周内和术后6周以后各个相I临观 察点之间BBB无显著差异。脊髓半横断切除实验组的损伤对侧 BBB，术后1、2、3、4、5周各个相临观察点之间BBB有显著差异，术 后I周内和术后5周以后各个相临观察点之间BBB无显著差异。 脊髓全横断损伤组和对照组左右两侧肢体BBB，术后8周内各个 相临观察点之间无显著性差异。组织形态学：8周实验动物脊髓 组织切片，HE染色示：脊髓半损伤组损伤对侧可见少量白质残 留，损伤范围扩大，越过中线，损伤侧无神经纤维残留；脊髓全损伤 组于损伤全长未见脊髓组织残留，同时损伤头侧和尾侧可见胶质 瘢痕，且损伤长度增加。1， 7 讨 论 本实验中采用磨钻磨除棘突和榷板。尽可能减少暴露脊髓过 程中对脊髓的损伤。实验结果证明，仅行椎板磨除的对照组实验 动物术后无一例出现脊髓功能障碍。实验中使用了剃须刀片自制 的长度2ram?的切割刀，脊髓切除时，确保切割长度和切割范围 恒定，不但将脊髓损伤标准化；而且，切割刀在手术过程中并不抽 出，延长的刀身具有脊髓压板的作用，即能充分暴露椎管内组织， 还能在使用负压吸引器的过程中保护对侧脊髓组织；同时，由于刀 身的保护作用，术者不用顾及