沾化冬枣栽培区土壤抗病菌库的初步建立及其优势菌的分类鉴定.pdfVIP

摘 要 本研究以琼脂块法从山东省沾化县冬枣栽培区的土壤中筛选出 60 株具有广谱抑菌性 的放线菌，并保种构建一个简单的基础抗病菌库。从抗病菌库中分离得到两株分别对细菌 和真菌有着很好的抑制效果的放线菌G2 和L6 ，分类鉴定G2 和L6 ，并优化L6 的发酵条 件。本研究旨在为冬枣果实病害生防药物的研发提供丰富的抗病菌种以及理论支持。研究 结果如下： 1、对山东沾化县冬枣栽培区的春秋两季的不同质地、不同栽种年限的土壤中的放线 菌数量进行研究发现：沾化县冬枣栽培区土壤中，春季土壤中放线菌含量低于秋季土壤， 有明显的季节性；根际土壤中放线菌数量高于根外土壤，呈现显著的根际效应；随着枣树 种植年限的增加，放线菌数量呈现上升趋势；该地区砂质土壤中放线菌数量高于粘质土壤， 这可能是因为砂土通风性较好，有利于放线菌的生长，总体说明影响放线菌数量的因素很 多。 2 、本实验共分离到325 株放线菌。用琼脂块法进行初筛，得到60 株具有较好广谱抑 菌性的放线菌，其中9 株效果尤为明显，而通过对发酵液的抑菌活性测定，得到了两株放 线菌G2 和L6 。G2 具有广谱细菌抑菌性，L6 具有广谱真菌抑菌性尤其对沾化冬枣黑斑病 病原菌有显著抑菌性。 3、对G2 和L6 进行分类鉴定，将它们初步鉴定为灰黄链霉菌（Streptomyces flavogriseus ） 和白黄链霉菌（Streptomyces alboflavus）。 4 、运用响应面优化试验对放线菌L6 的发酵培养基和发酵工艺条件进行优化。得出L6 发酵的最适培养基为: 葡萄糖为30 g/L，玉米粉为22.43 g/ L，蛋白胨为1 g/ L ，黄豆粉为 10 g/ L，磷酸氢二钾为0.27 g/ L ，氯化钠为0.49 g/ L ，硫酸镁为1.0 g/ L。最佳发酵工艺 条件为：装液量100ml/500ml，pH 值7.5，发酵时间145 h ，接种量为606ul/100ml ，发酵 温度28 ℃，转速140rpm。 关键词：拮抗放线菌 筛选 鉴定 发酵条件 响应面 优化 I 万方数据 Abstract The 60 actinomycete strains were screened from the dong zao cultivation plots in Zhanhua. An actinomycete strain had strong inhibitory activity to bacteria and an actinomycete strain had strong inhibitory activity to Alternaria tenuissima were screened by agar block method. And they were classified and identified . The purpose of this study was to provide theoretical and experimental basis to prevention and control of dongzao fruit diseases . Ma in contents and results of this study were listed as follows. Actinomycete quantity in the soil with different character of the dong zao cultivation plots in Zhanhua in spring and autumn were studied. The result indicated that the surface of root soil was signally more