黄硬皮马勃子实体提取物抑菌活性.pdfVIP

食用菌学报⑥2016．23(2)：65～69 DoI：10．16488／j．cnki．1005—9873．2016．02．013 黄硬皮马勃子实体提取物抑茵活性 周会明1’2，张焱珍1’2，柴红梅2，张小雷孙，刘璇1，孔令舰2，和娇娇1 (·滇西科技师范学院农学系，云南临沧677000；2云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所，云南昆明650221) 摘 要：采用丙酮、正己烷、乙酸乙酯、正丁醇、石油醚、95％乙醇6种不同溶剂分别提取黄硬皮马勃 (＆跆，oderm口西n凇m口r论凡靶)子实体活性物质，并用纸片琼脂法测定黄硬皮马勃子实体提取物对4种细菌的抑 显抑菌效果；6种不同溶剂提取物对不同的细菌表现出相同抑菌规律，其中95％乙醇提取物的抑菌效果相对 较强，抑菌圈直径可达30．83mm，该溶剂的提取物对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌的最小抑菌浓度分别为 0．15、0．23 mg／mL。 关键词：黄硬皮马勃；提取物；抑菌作用 黄硬皮马勃(＆ferD如rm口5i凡，l口mn (＆fer0如rm口)，该属真菌分布广泛，种类多，大多具有抑菌、杀虫、清热、抗病毒等药效[14]。比如，橙黄 研究人员针对黄硬皮马勃的研究主要在其多样性‘㈨4|、系统发育口}161、酸性磷酸酶活性[17|、营养特 性[1毗01、着色成分口胡等，至今鲜见有关其抑菌活性的研究报道。 菌活性，为进一步开发新型的微生物源抑菌剂提供参考。 1材料与方法 1．1供试菌株 野生黄硬皮马勃(5．鲥n几口m口r沱凡髭)子实体由云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所提 (S．口M，e“s)、四联球菌(M．fefmgenMs)由滇西科技师范学院农学系提供。 1．2培养基 YPD固体培养基：2．0％葡萄糖，0．2％蛋白胨，0．2％酵母提取粉，1．5％琼脂，pH自然。 NaCl，12．0 7．4～7．6口2|。 细菌培养基：5．0g牛肉膏，10．0g蛋白胨，5．0g g琼脂，1000mL水、pH 1．3活性物质提取 将黄硬皮马勃子实体洗净，阴干，粉碎，过100目筛。称取12份灰黑色样品，每份13．95g，分别按 mL各两份，静置提取10h，抽 料液比1：30加丙酮、正己烷、乙酸乙酯、正丁醇、石油醚、95％乙醇418．5 r／min)浓缩、60℃下烘干并称 滤‘23。。一份将所得的红褐色提取滤液用旋转蒸发仪60℃下(转速31 重。另一份将抽提液浓缩至样品浓度为3．82 mg／mL，置于4℃冰箱备用。 收稿日期：2016一01—17原稿；2016—02—23修改稿 基金项目：国家食用菌产业技术体系(CARS．24)、国家自然科学基金资助 作者简介：周会明(1984一)，2011年毕业于昆明理工大学，硕士，讲师，研究方向为大型真菌驯化与育种。 ’本文通讯作者 E-m枷：1262529770@qq．com 万方数据 食用菌学报 第23卷 1．4药敏片制备 选择干净的实验用滤纸，用打孔器制备直径为6mm的滤纸片，灭菌。取18～20片滤纸片置于事 先灭过菌的直径为60mm培养皿内，加入6种不同样品液使滤纸片完全浸润后风干备用。 1．5菌液制备 将大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、四联球菌活化后，分别接种于细菌培养基平板表面， 4|。 在25℃下培养3d后分别取一接种环，加入10mL无菌水制备菌液‘2 1．6抑菌试验 采用纸片琼脂法测定抑菌活性[25|。取四种菌液各3～5滴，分别加入到已制备的供试培养基平板 内，用无菌的涂布棒均匀涂平板。将6种风干的药敏片依次置于带菌平板上，同时以无菌水作为空白