流式细胞仪的原理及应用.PDF

2·86 · J ournal of Handan Medical Colle ge ,J une 2003 ,V ol 16 ,N o . 3 ·医疗器械· 流式细胞仪的原理及应用 郑海萍 　李艳辉 (河北省邯郸医学高等专科学校 　056029) ( ) 【中图法分类号】　R197. 39 　　　　　【文献标识码】　A 　　　　　【文章编号】　1008 - 3073 2003 03 - 0286 - 01 【关键词】　流式细胞仪 　　原理 　　应用 　　流式细胞仪 ( Flow cytometer , FCM) 亦称荧光激活细 效做出评价 , S 时相细胞在细胞周期中百分比可反映增殖 胞分类仪 ( FACSC) , 是一种将现代免疫荧光技术与流体力 力 , 异倍体在实体肿瘤中出现率达 60 %～100 % , 并可出现 学、激光学、应用电子学和计算机等学科的先进技术相融合 于癌前病变中。 用于基础与临床细胞生物学研究的一项高科技实验设备。 32 　在免疫学中的应用 : FCM 广泛应用于免疫学的基础研 1 　流式细胞仪的分析原理 究及疾病进展监测 , 迅速推动免疫学的进展。流式细胞仪应 流式细胞仪由以下几个系统组成。 用抗体或配基与相应抗原或受体结合来做细胞类型鉴定。 液流系统 : 制备好的单细胞悬液通过样本管被压进喷嘴 32 1 　细胞表面标记及抗原决定簇的研究 : 结合针对血液 ( SIP) 的中央 , 同时无细胞的鞘液也被压入 SIP , 形成包绕 系统不同表面标记的单克隆抗体的应用 , 可以进行免疫状态 细胞的鞘液流 , 使细胞以单列进入流动室 , 与水平方向的激 监测和白血病免疫分析等。研究表明 , T 淋巴细胞亚群在各 ( ) ( ) 光光束 一般为 488nm 的氩离子激光 垂直相交。 种临床疾病 如自身免疫性疾病、免疫缺陷疾病等 均有改 光学系统 : 稳定的液流推进装置使样本呈单列、每个细 变 , 如 CD + 细胞增多 , 见于病毒感染 ( HBV 、CMV 、EB 8 胞以均等的时间依次通过激光照射区 , 被荧光染色的细胞受 ) 等 。用 FCM 可定量获得有关细胞表面分子结构和抗原决 照射后 , 产生两种信号 , 一种是散射光信号 , 又分为前向散 定簇的化学性质及成分比例。 射光 ( Forward scatter , FSC) , 一般与细胞体积的大小呈正 2 3 　在临床血液学中的应用 : 血液是天然的单细胞悬液 , 比; 侧向散射光 ( Side scatter , SSC) , 与细胞的颗粒度和复 简单处理即可用 FCM 分析 , 因此 FCM 在血液学上的应用 杂性有关。另一种为荧光信号 , 发射的荧光与结合位点呈正 愈加广泛。 比。 2 31 　细胞 DN