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3(} 维普资讯 5矿一 J 130 上海医学检验杂志 1993年第 8卷第 3期 电子 自旋共振法检测血浆 自由基 浙江医科大学附属儿童医院(杭卅I3l0003) 陆 航 孙 琼 浙江大学顺磁研究室 冯亚菲 乙， 何 玲 徐元植 4牛 ．／』2 内容提要 本文探讨了血浆自由基的ESR检测方法，结果提示血浆宜玲冻千燥后常温测 定 ·注意血浆冻干过程的真空环境 ．标本离体后宜尽快球干和检测 ．设置对照组等．并得出本实验 条件下的有关检测参数 本文的检测结果还表明血浆 自由基与血浆和红细胞LPO均呈明显的正 自由基是指含有未配对 电子 的原子、分子或离 结 果 子 ，具有广泛的生理功能，也涉厦炎症、肿瘤、衰老等 1．血浆样品的ESR测定 按 A、B法处理的 病理过程。由于多数 自由基寿命短、造成检测 困 每 一份血浆样品分别在室温 (约 20℃)和低 温 (一 难 。近年来在生物医学中 日益受到重视的电子 100℃)条件下经ESR仪反复调试检测 ．均未发现 自 自旋共振 (electronspinresol3ance，ESR)技术能直 由基信号(每种方法各 5份样品，附图A) 接检测 自由基信号．是研究 自由基最直接有效的方 按 C法处理的冻干血浆样 品在室温下 ESR 仪 法0 。抱们探索 了应用该技术测定血浆 自由基的 测定发现明显的 自由基信号 为得到正确清楚的 方法 ．并探讨血浆 自由基与血浆和红细胞脂质过氧 ESR图谱 ，必须选择最佳的检测条件．经反复调试 化物 (LPO)的关系 ，特予报道 后的检测 参数为 ：x波段 ，用 100KHz高频调制 ．微 材料 和 方 法 波功率 4mW ，中心磁场 330±25mT，时间常数 0．3 1．仪器 日本 JES--FE1XG型 ESR仪等。 sec样品 自由基谱宽 10G，g值约 2．004(附图B)样 2．血浆 自由基检测 抗凝静脉血(EDTA终浓 品放置 1天后 复测 其 自甘f基情号 明显减弱 (附图 度 0．1mmol／L)分离血浆后按 下述方法之 一娅理 C) A法：玻璃毛细管 (直径 lmm．下 同)吸取 30tA 血浆，两端封 口后倚测 * i m辈 (^】 B法 ；装入 3Ou1血浆 的封 121玻璃毛细管贮干 液氨中(标本离体后 l0分钟内完成此操作)待侧 。 C法：0．2ml血浆置于冷冻干燥仪上干燥 (近 似真空环境 ，一60℃)4小时后成粉末，装入玻璃毛 细管内约 2cm 高 ，准确称重后封 13待侧 自由基．剧定方法 已装样品的玻璃毛细管置于 石英样品管后放^ ESR仪谐振腔 内检测．检 测程序 f血 g敖 l ( 按仪器说 明书进行 本文以Mn 作为内标．已知浓 啧 的金I孽f石 (3．665×1o”spln／mg)为对照物 ，通过 样品与对照物的波峰面积比得出样 品的自由基浓 附图 血浆 自由基 的EY,R图谱 度。 2．血浆 自由基与血浆和红细胞LPO关系 本 3．血浆和红细胞 LPO测定 血浆和红细胞 文采用同份标本的