噬菌体能否作为人用疫苗.pdfVIP

·1O · 国际生物制品学杂志2006年2月第29卷第 1期 IntJBiologieals，February20061rIl ， ． 噬菌体能否作为人用疫苗? 刘晶星编译 【摘要】 噬菌体是细菌病毒，由外裹蛋白衣壳的核酸组成。在真核宿主中，噬菌体不能复制，如无合 适的原核宿主，噬茼体如同无生命的颗粒性抗原 近年研究显示，完整的噬菌体颗粒可用来传递附着于 其修饰衣壳蛋白上的免疫肽疫苗，或通过将真核启动子驱动的疫苗基因掺入噬菌体基因组而成为DNA 疫苗的传递载体。虽然这两种方法很有希望，但今后有可能建立能共同传递肽疫苗和DNA疫苗的杂交 噬菌体则更令人振奋 。 【关键词】 细菌噬菌体；疫苗，DNA；接种 【中圈分类号1Q939．48 【文献标识码】A 【文章编号11673—421l(2006)01—001O-03 噬菌体是细菌病毒，在与宿主细胞特异性受体 噬菌体展示融合蛋 白除用作免疫原外，还用于 结合并注入其 DNA后 ，能将其 DNA整合进宿主基 将噬菌体靶向特定的细胞类型以便在基因治疗 中传 因组(溶原性)，或用于合成新的噬菌体颗粒。噬菌体 递核酸。展示肽能产生与亲代蛋白分子序列相同的 可以是单股 DNA(如 M13、fd和f1)、双股 DNA(如 各表位结构或模拟表位 ，而模拟表位 的短肽序列能 噬菌体)、双股 RNA(如f6)或单股 RNA(如 MS2 模拟异源蛋白或糖表位的免疫学性质。噬菌体还用 和Q口)。噬菌体在 自然环境中普遍存在 ，数量和种类 于表达抗体片段 ，这样就能从库 中分离展示特异性 远多于细菌 。 抗体的噬菌体。 噬菌体是研究生物学功能的有用工具。近年，人 1．1 表达特定表位 的展示噬菌体接种 们又将噬菌体用作疫苗的传递载体。已从噬菌体展 根据以往获得的生物体知识，人们可以从蛋 白 示库中分离到能展示与衣壳蛋 白融合的免疫原性多 质中选出保护性免疫原性表位并克隆进噬菌体展示 肽的丝状噬菌体，它能诱导针对重组肽的免疫应答 。 载体。与天然蛋白构象相 比，噬菌体展示肽可能不能 最近 ，人们又将 DNA疫苗表达盒克隆进标准 噬 保持表位的构象活性，但这种肽仍可诱导抗亲代虽 菌体载体，用整个噬菌体颗粒而非纯化 DNA免疫 白的强烈免疫应答。例如，Bastien等根据呼吸道合 宿主。小 鼠、家兔和羊的免疫结果显示，与裸 DNA 胞病毒信息，构建了展示保护性表位(糖蛋白G)的 免疫相比，噬菌体传递的DNA疫苗诱生的抗体应 噬菌体 ，在小 鼠模型中，腹腔注射展示这种疫苗肽的 答持续时间更长 ，滴度更高 。 丝状噬菌体后，可保护小 鼠免受病原体的攻击。对 1 噬菌体展示 HIV一1gpl20V3环多肽展示噬菌体的研究也得到 为生产噬菌体展示构建体 ，将编码异源肽 的 同样结果。但在传递噬菌体衣壳蛋白一疫苗肽融合体 DNA克隆进噬菌体基因组 ，使之与其中一种衣壳蛋 时，不是所有的构象活性表位都能被保 留下来 ，所以 白基因融合成为转录融合体 。当此重组噬菌体复制 该技术可能只限于无构象活性 (线性)的保护性表 时，新的噬菌体颗粒在其表面以融合衣壳蛋白的方 位 。 式表达异源肽。噬菌体展示异源肽的第一篇报告发 1．2 用从随机肽库 中分离的展示噬菌体克隆免疫 表于 1985年 。随后。噬菌体展示被用于建立随机肽 接种 表位库 。用于筛选特异性抗体或分离能与特异性受 可用抗血清从随机噬菌体展示库中筛选能与已 体结合的噬菌体。插人物的DNA测序可迅速确认 知特异性抗体反应的克隆，也町用患者恢复期血清 相关肽的氨基酸序列。