流加培养裂殖壶菌发酵生产二十二碳六烯酸.pdfVIP

第 48卷 第 1期 厦 门大学学报 (自然科学版) Vo1．48 No．1 2009年 1月 JournalofXiamenUniversity (NaturalScience) Jan．2009 流加培养裂殖壶茵发酵生产二十二碳六烯酸 陈丽珠 ，凌雪萍 ，敬科举 ，白 帆 ，袁 源 ，卢英华 。 (1．厦 门大学化学化工学院，2．化学生物学福建省重点实验室，福建 厦门 361005) 摘要：利用流加技术高密度培养裂殖壶菌生产二十二碳六烯酸(DHA)．根据裂殖壶菌间歇发酵的特性，通过分别流加 浓缩全培养基和高浓度葡萄糖 (600g／L)以提高细胞密度和DHA含量．结果表明，当培养过程中葡萄糖浓度降至 10g／ L左右时，采用变速流加葡萄糖使发酵液 的糖浓度维持在 1O～2Og／L之间，对裂殖壶菌的生长和脂肪酸的积累最有利， 发酵 120h后 ，其生物量 、脂肪酸 以及 DHA含量达到最大值 ，分别为 60．6、40．2和 8．0g／L，DHA累计速率为66．7mg／ (L ·h)． 关键词 ：裂殖壶菌；DHA；流加培养；生物量 中图分类号：Q815．1 文献标识码 ：A 文章编号：0438—0479(2009)01—0084—05 二十二碳六烯酸 (Docosahexaenoicacid，简称 DHA)是一种极其重要 的 3系列不饱和脂肪酸，具 1 材料和方法 有促进婴儿脑细胞生长发育n]，保护视力[2]，治疗心血 1．1 菌种和培养基 管疾病及提高免疫能力等多种重要 的生理功能口 ]， 裂殖壶菌系从浙江温州乐清海湾红树林分离、筛 受到医疗界及食 品界 的广泛关注．目前 DHA 的商业 选所得． 来源主要是深海鱼油 ，但 由于鱼油中 DHA 含量相对 种子培养基 ：3Og／L葡萄糖，10g／L酵母膏，0．5 比较低、油的品质不稳定、且随鱼的种类、季节、地理位 倍浓度 自然海水． 置等变化而变化 ，不能满足 日益增长的市场需求．利用 发酵培养基 ：125g／L葡萄糖，10g／L酵母膏，5 微生物发酵法生产 DHA具有周期短 ，脂肪酸构成简 g／L大豆蛋 白胨，2g／L固体玉米浆，0．5倍浓度 自然 单，不受原料的限制，易于提纯等优点，有望成为高纯 海水． ． 度 DHA的有效来源．目前常用 的生产 DHA 的微生 1．2 培养方法 物主要有裂殖壶菌(Schizochytrium sp．)、破囊壶菌 1．2．1 菌种培养 (Thraustochytriurnsp．)以及 隐甲藻 (Crypthecodini一 菌种活化 ：将保藏于一80~C的菌种转接于斜面， “cohnii)等异养微藻[7]，它们都是商业化生产 25℃培养 3～4d．一级种子：用接种环挑取活化的菌 DHA的可能性来源．其 中，裂殖壶菌是一种可利用葡 种 ，接入装有 5OmL种子培养基 的250mL三角瓶， 萄糖为碳源的异养型海洋真菌，其营养细胞进行连续