HCBP1的细胞定位及与HCV核心蛋白在体内的相互作用.pdfVIP

2007；27(12) 南方医科大学学报(J South Med Univ) ·l809· HCBP1的细胞定位及与HCV核心蛋白在体内的相互作用 陈天艳，刘 敏，陈云茹，蔺淑梅，叶 峰，张 曦，刘锦锋，赵英仁，张树林(西安交通大学医学院第一附属医院传染 科，陕西 西安 710061) 摘要：目的探讨HCV核心蛋白与(HCBP1)HCV核心蛋白的相互作用蛋白在真核细胞内的相互作用。构建增强型绿色 荧光蛋白(EGFP)与HCBP1融合蛋白真核表达载体，分析其在COS．7细胞中的表达和亚细胞定位。方法PCR分别扩 增含HCV核心及HCBP1的eDNA片段，克隆人pGEM T载体，经测序正确后，分别克隆人哺乳双杂交的表达质粒pM 和pVP16中，并转染人COS．7细胞，48 h后检测细胞中报告基因CAT的表达水平。将HCBP1的cDNA片段克隆人绿 色荧光表达载体pEGFP．C1中，构建HCBP1．EGFP融合蛋白的表达载体，转染COS．7细胞，以Western blot和荧光显微 镜分析融合蛋白的表达及其细胞定位。结果CAT．ELISA检测显示pM．核心蛋白与pVP16．HCBP1实验孔吸光度