微生物的实验室培养.pptVIP

* * 一、培养基： 1.概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质—培养基 3.营养构成： 各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，此外还要满足微生物生长对PH、特殊营养物质以及氧气的要求 注：自养微生物的碳源是无机碳；异氧型微生物的碳源是有机碳，培养不同类型的微生物，培养基的组成成分一般不同。 2.分类： (1)按营养成分分类： 1.天然培养基： 优点：取材方便、营养丰富、种类多样、 配制方便 缺点：成分不确定，适用于大生产中发酵培养基 2.合成培养基： 优点：成分精确 缺点：配制较复杂，价格较贵 （2）按物理状态分类： 1、固体培养基：主要应用于微生物的分离与鉴定 2、液体培养基：工业上微生物的培养 （3）按功能分类： 1.选择培养基：根据某种微生物的特殊营养需求或其对化学、物理因素的抗性而设计的培养基 2.鉴别培养基：在培养基中加有能与某一菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而用肉眼就能使该菌落与其他外形相似的它种菌落相区分的培养基。主要应用与鉴别菌种（如：伊红—美蓝培养基） 4、配置天然培养基用的几种原材料特性： 牛肉膏：瘦牛肉加热抽提并浓缩成的膏状物。 价值：富含糖类，有机含氮类，水溶性维生素和无机盐等。 蛋白胨：由酪素或明胶等蛋白质经酸或酶水解而成。 价值：富含有机氮，其中可能还有多种维生素和氮源。 琼脂：从某些海藻中加热提取的复杂糖类。 价值：配置固体培养基时常用作凝固剂，无营养价值 二、无菌技术： （一）、区别消毒和灭菌： 1、消毒是指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子） 常用方法： （1）.煮沸消毒法：100摄氏度煮沸5—6分钟可杀死微生物营养细胞及部分芽孢 （2）.巴氐消毒法：70—75摄氏度煮30分钟或80摄氏度煮15分钟 （主要应用于不耐高温的液体如：牛奶、啤 酒、果汁、酱油等） （3）.化学药剂消毒：（如酒精擦拭双手、喷洒石炭酸等） （4）.紫外线消毒 2、灭菌：使用强烈理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子 常用方法： 1.灼烧灭菌：将各种金属用具直接在酒精灯火焰的 充分燃烧层灼烧 应用：（1）接种环、接种针等金属用具 （2）试管口或瓶口等容易被污染的部位 2.干热灭菌：干热灭菌箱，在160—170摄氏度加热、1—2小时 应用：玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具 3.高压蒸汽灭菌：高压灭菌锅 注：（1）使用时要待冷空气排尽，再密封 （2）灭菌时压力为100KPa，温度121摄氏度 应用：培养基灭菌 2. 在微生物培养时获得纯净培养物的关键 防止外来杂菌入侵， 无菌技术主要围绕如何避免杂菌的污染展开，包括以下内容： （1）对实验操作的空间，操作者的衣着和手进行清洁和消毒 （2）将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌 （3）实验操作应在酒精灯火焰附近进行 （4）操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触 注：实验后，所有用过的培养基，培养液等都要统一