新编仪器分析色谱理论.ppt

广西大学 生命科学与技术学院 8.3.2 塔板理论 1941年詹姆斯(James)和马丁(Martin)提出塔板理论，并用数学模型描述了色谱分离过程。 塔板理论 在柱的一小段H内，组分可迅速达到平衡。 以气相为例，载气脉动式进样，每次进1个体 积△V 。 所有组分开始时，存于0号塔板。 分配系数K在所有塔板是常数，与量无关。 塔板模型 N=0 1 2 3 4 进样 分配 平衡 进气 分配 平衡 塔板模型 组分在N=5, k=1， mL=1mg柱的流出数据 组分流出曲线 1.流出曲线方程 一般色谱柱的塔板数很大，约为103～106，此时的流出曲线趋近于正态分布曲线，该曲线上的浓度c与时间t的关系可用下式表示。 2.理论塔板数与峰底宽度的关系 由塔板理论的流出曲线方程可导出理论塔板数与 色谱峰底宽度的关系。 根据流出曲线的正态分布方程，可有另一种表达式，即 理论塔板数与峰底宽度的关系式推导 (1)当V=VR时，c 值最大， 因为e 0=1 上式变为： (2)当VR-V= W 1/2时: 式(8.22)可写成 由上式可得理论塔板数n与保留时间tR、半峰宽W 1/2、峰底宽W的关系为： 设色谱柱长为L,塔板间距离为H(板高)，色谱柱的理论塔板数为n，则三者的关系为： n = L / H 由于死时间tM与固定相无关，应予扣除，用t’R代替tR才能反应真实的柱效，此时计算的理论 塔板数称为有效理论塔板数neff  在实际应用中，经常出现计算出来的n值尽管很大，H很小，但色谱柱的分离能力却不高的现象。这是由于采用tR计算时，并未扣除死时间tM ，而tM并不参与柱内分配，故要用 t’R代替 tR. 理论塔板数 n和有效理论塔板数 neff的关系: 色谱过程不仅受热力学因素影响，同时还与分子扩散、传质等动力学因素有关。 塔板理论只能定性地给出塔板高度的概念，却不能给出影响塔板高度的因素，因而无法解释造成色谱扩展使柱效能下降的原因及不同流速下可以测得不同理论塔板数的事实。 8.3.3 速率理论 Van Deemter 的速率理论，吸收了塔板理论的板高概念，指出理论塔板高度是色谱峰展宽的量度，导出了塔板高度与载气线速度的关系式。此关系式称为速率理论方程式，简称范氏方程，对气相和液相色谱都适用。数学简化式为 (8-28) 曲线最低点所对应的板高H最小，即该点所对应的柱效最 高，此时的流速称为最佳流速（即速率方程式中塔板高度对 流速的一阶导数有一极小值）。 H-u关系曲线 当u小于最佳流速时，B/u项起主导作用，H随u的 增大而降低，柱效增高。 1.涡流扩散项(A) 在填充色谱柱中，流动相碰到填充物颗粒时，不断地改变流动方向，使组分分子在前进中形成紊乱的类似“涡流”的流动，故称涡流扩散。 其变宽的程度由下式决定： 1.涡流扩散项(A) 2. 分子扩散项(B/u) 分子扩散项(B/u) 分子扩散项又称纵向扩散，是由浓度梯度造成的。 分子扩散项系数为 B 扩散项系数 式中γ为弯曲因子，它反映了填充物颗粒的几何形状对自由分子扩散的阻碍程度。对填充柱γ=0.5～0.7，对毛细管柱γ=1。 Dg为组分在流动相中的扩散系数，其大小与组分的性质、流动相的性质及柱温等因素有关。相对分子质量大的组分，扩散不易，Dg小。Dg