猪细小病毒VP2的原核表达与多克隆抗体制备_禹婷婷.pdf

动物医学进展， ， （）： ５ ０１６ ３７ ５ ７ ２ ２ ４－ Ｐｒｏ ｒｅｓｓｉｎＶｅｔｅｒｉｎａｒ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ｇ 　 　 ｙ 　 猪细小病毒ＶＰ２的原核表达与多克隆抗体制备 ＊ 禹 ， ， ， ， ， ， 婷婷 黄 勇 张 樑 张洪玲 王振宇 赵志敏 童德文 　 　 （ ， ） 西北农林科技大学动物医学院 陕西杨凌 ７１２１００ ： （ ） ， 摘 要 克隆猪细小病毒 ＰＶ ＶＰ２基因全长 ４０ｂ 构建其原核表达载体后进行蛋白的表达与纯 Ｐ １７ 　 　 　 　 ｐ ， 。 方 全 ， 化 接种家兔制备多克隆抗体 用 法扩增 长基因 扩增产物克隆至表达载体 ３ ＣＲ ＰＶ ＶＰ２ Ｔ ２ａ Ｐ Ｐ Ｅ － 　 ｐ 并 （ ） 。 、 、 ， 转化至Ｅ．ｃ Ｂ 感受态中 分别用不同诱导时间 浓度 温度诱导表达 重组蛋白 经 ｏｌｉ Ｌ２１ ＤＥ３ ＰＴＧ Ｐ２ Ｉ Ｖ 　 电 。 ， 。 扩 Ｐ 泳切胶回收纯化目的蛋白 对家兔进行 次免疫后 采集血清制备抗体 增得到 ＤＳ ＡＧＥ ＣＲ Ｓ － ３ Ｐ ； ， ， ／ 的 基因片段 构建原核表达载体 ３ Ｖ 经３７℃ ＩＰＴＧ浓度 诱导表达 １７４０ｂ ＶＰ２ ＥＴ ２ａ Ｐ２ １．０ｍｍｏｌ Ｌ ４ｈ － － 　 ｐ ｐ ；