检验方法的性能验.pptVIP

定量分析方法性能验证（什么是？怎么做？） 王会茹 性能验证 根椐美国CLIA,88临床实验室质量保证文件要求，从保证检验质量考虑，实验室在使用新检测系统作患者标本检测前，必须在实验室的具体条件下，用试验去验证检测系统的基本分析性能。只有真正认可了检测系统的分析性能符合本实验室及临床要求，或和厂家的资料一致，才可以用于常规检测。 性能验证 是通过试验途径测定并评价方法的性能。如精密度和准确度，在试验中测定的是不精密度和不准确度，不论不精密度还是不准确度，强调的都是误差，评价试验的过程就是对误差的测定，因此方法评价的各项试验是配合各种类型的分析误差而设计的。 分析误差类型及验证试验 性能验证的内容 1.精密度 2.准确度 3. 不确定度 4.携带污染率 5.可报告范围 6.参考区间 7.比对试验 一般要求 试验人员必须掌握仪器操作和维护程序、标本准备方法和校准。 对较简单的设备需要5天或更少的时间，对较复杂的多通道设备需要5天或更长的时间。 在完成仪器熟悉过程后开始实验并收集数据。 评价实验应在操作者完全熟悉实验过程和评价方案以后进行。 1 .精密度 精密度---在规定条件下获得的独立测量结果之间的接近程度。精密度通常用不精密度表示，不精密度用标准差或变异系数表示。标准差越大，精密度越低。 精密度的内容包括：批内、批间精密度。 批内精密度：指在相同条件下（时间、校准、方法、操作者、仪器、环境等）获得的精密度，即重复性。 批间精密度：是指在一种或几种条件因素发生变化，但在同一实验室内获得的精密度，即再现性。 试验要求： 为减少对结果的影响因素，全部实验过程中应使用同一批号的试剂和校准物。 实验标本可采用稳定的、以蛋白质为基质、可模拟临床标本特性的产品，如校准品，质控品， 病人标本。必要时，可采用稳定的混合冷冻血清,标本量足够。 选择标本浓度时应接近医学决定水平（临床按照不同病情给予不同处理的指标阈值），一般推荐使用二个或二个以上浓度的标本。 医学决定水平 一个诊断试验一般有3个医学决定水平，①提示需要进一步检验的阈值，相当于待诊值。②提示需要采取治疗措施的界值，相当于确诊值。③提示预后或需要紧急处理的界值，另外有些指标需要设立危急值。 实验方案 参照NCCLS(美国国家临床实验室标准委员会) EP5-A文件。 批内不精密度：取二个水平的新鲜血清或质控血浆，连续重复测定20次，计算SD ,CV。 批间不精密度：选择二个水平的新鲜血清或质控血浆，连续重复测定20天，计算SD ,CV。 性能要求 由临床医学家和临床化学家共同研究制定，既应反映临床应用与解释结果的要求（称医学效用限度），又应基本符合实验室所能达到的技能状态。 ISO15189认可准则不精密度要求：以能力验证/室间质评评价界限作为允许总误差（TEa），重复性精密度＜1/4 TEa,中间精密度＜1/3TEa. 评价标准 2准确度 准确度：是一次测量结果与被测量真值的接近程度。它涵盖正确度和精密度，他往往以不准确度来衡量，不准确度的数字表达是不确定度。 正确度：大量测得均值与真值的一致程度。是系统误差分量的度量，以偏倚来表示。偏倚越大，正确度越差。 精密度：在规定条件下，独立测试结果间的一致程度。是随机误差分量的度量，以标准差来表示。标准差越大，精密度越低。 准确度、正确度、精密度关系 从字面上准确度、正确度往往使人困惑，但从实验误差理论来解释就比较容易理解。正确度是系统误差分量的度量；精密度随机误差分量的度量。 要做到准确度高，第一要求正确度高，无偏倚或偏倚小，这就需要由大量测试结果的平均值与参照值进行比较才能求出，也就是系统误差小；第二要精密度高，即随机误差要小，试验重复性好。这样只有正确度和精密度都高的结果其准确度才高。 准确度、正确度、精密度关系 准确度、正确度、精密度关系 1图：正确度、精密度都高，因而准确度也高。 2图：精密度高，正确度不好，存在偏倚，因而准确度不好。 3图：正确度、精密度都不好，既有系统误差存在，随机误差又很大。 4图：精密度不好，但正确度好，但离散程度很大，无法保证准确度的可靠性。 通过正确度、精密度这两个指标，才能完整体现检测结果的准确程度。 准确度评价方法1 根据NCCLS EP9-A2文件，将检测系统通过具有溯源性的校准品校准后，检测两个浓度定值质控品，连续检测3次取平均值计算其相对偏倚。若相对偏倚%在规定的允许限制内，结果可接受，其准确度可被认可。 均值-靶值 偏倚= ----------------- % 靶值 准确度评价方法2 参加室间质量评价项目，采用卫生