肿瘤学-细胞周期.ppt

Cell cycle control Cancer;肿瘤是细胞周期调控机制破坏的疾病。;2001 Nobel Prize;Leland Hartwell;Paul Nurse;Tim Hunt;有关细胞周期的原创性发现（问题，模型，现象，工具）对细胞生长的所有方面都具有巨大的影响。细胞周期控制的缺陷会导致见于肿瘤细胞中的某种染色体改变。这些发现能让我们在今后很长的时间内创造治疗癌症的新方法。;细胞周期概述;;;Interphase: – G1: gap – (G0: quiescent state during which cell cycle does not proceed) – S: replication of DNA and assembly of chromosomal proteins on daughter DNA molecules – G2: gap M phase: mitosis (nuclear division) cytokinesis (cytoplasmic division);细胞增殖是生命的基本特征;根据增殖状况，可将高等动物的细胞分为三类： ①连续分裂细胞，如表皮生发层、部分骨髓细胞。 ②休眠细胞，暂不分裂，但适当刺激下可重新进入细胞周期，称G0期细胞，如淋巴细胞、肝、肾细胞，干细胞等。 ③不分裂细胞，不再分裂，又称终端细胞，如神经、肌肉、多形核细胞等。; ◆细胞周期长短;;;;;细胞周期阻滞的几种结局;Mechanisms involved in cell cycle control:;1. MPF(M phase –promoting factor) , Cyclin ,CDK ;1970s Rao等发现与M期细胞(Hela)融合的间期细胞染色体发生凝缩，称为早熟凝集染色体（PCC）。 G1期PCC为单线状，因DNA未复制。 S期PCC为粉末状，因DNA由多个部位开始复制。 G2期PCC为双线染色体，说明DNA复制已完成。 不同类的M期细胞也可诱导PCC产生，说明M期细胞具有促进间期细胞进行分裂的因子，即成熟促进因子( MPF)。;G1 phase fuse with M phase;s phase fuse with M phase;G2 phase fuse with M phase;Hartwell 1960s, Nurse 1970s 分别以芽殖酵母和裂殖酵母为材料，利用温度敏感突变株，发现许多与细胞分裂有关的基因( cdc)。如： 裂殖酵母cdc2、 芽殖酵母cdc28突变型在限制温度下无法分裂； wee1突变型则提早分裂，cdc25突变型细胞体积增大而不分裂； cdc2和cdc28都编码一个34KD的蛋白激酶，促进细胞周期的进行，weel和cdc25分别表现为抑制和促进cdc2的活性。;budding yeast ;Fission yeast ;Cdc 25 Wee1 mutant;T. Hunt 1980s发现海胆的卵裂过程中两种蛋白质的含量随细胞周期振荡，命名为cyclin A和B，其mRNA能诱导蛙卵成熟。;1988年Lohka??非洲爪蟾的MPF纯化。经鉴定MPF由32KD和45KD两种蛋白组成，是一种丝氨酸/苏氨酸激酶。进一步的研究发现MPF=cdc2+cyclin B ;The core mechanism of cell cycle regulation ;1.2 细胞周期素(cyclin ) 特点：在细胞周期中呈周期性变化。含有一段约100个氨基酸的保守序列，称为周期蛋白框，介导与CDK结合。 作用：激活和引导CDK作用于不同底物。 已知30余种，分为4类：G1型、G1/S型、S型、M型。;A2;G1期，在生长因子的刺激下，cyclin D表达，并与CDK4、CDK6结合，使下游的蛋白质如Rb磷酸化，释放转录因子E2F，促进许多基因的转录，如编码cyclinE、A、CDK1和DHFR的基因。 G1-S期，cyclinE与CDK2结合，激活DNA复制。 G2-M期，cyclinA、cyclinB与CDK1结合，CDK1引起染色体凝缩、核膜解体等。;;Experimental Demonstration that Cyclin D is Required for Passage Through the Restriction Point in the Mammalian Cell ; Overexpression （Gene Amplification） 乳腺癌、胃癌、食道癌 Chromosome reverse 甲状旁腺腺癌 Chromosome rearrangement B淋巴细胞白血病 G