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第三节 影响微生物生长的主要因素 免疫荧光抗体技术 酶联免疫技术 放射免疫分析测定技术 单克隆抗体技术 免疫金技术 核酸探针技术 PCR技术 环介导等温扩增技术 基因芯片技术 * 物理因素:温度、pH和氧气(最主要) 微生物的六大类营养要素 碳源、氮源、能源、 生长因子、无机盐、水 影响微生物生长的环境因素有很多,主要包括: 环境条件的改变,在一定限度内,可引起微生物形态、生理、生长、繁殖等特征的改变,或抵抗、适应环境条件方面的改变。当环境条件的变化超过一定能够界限,则导致微生物的死亡。 一、温度 温度是影响微生物细胞生长和存活的最重要的因素之一。 最低生长温度 最适生长温度 最高生长温度 3个重要指标 生长温度三基点 (three cardinal point) 微生物作为整体来言,其温度的三基点是极其宽的,堪称“生物世界之最”。 最适生长温度(optimum growth temperature)简称最适温度,是指某菌分裂代时最短或生长速率最高时的培养温度。 二、氧气 氧对微生物的生命活动有着极其重要的影响。 好氧微生物(好氧菌,aerobes) 厌氧微生物(厌氧菌,anaerobes) 细分为5类 微生物与氧的关系 1971年提出关于专性厌氧生活的超氧化物歧化酶(SOD)学说。 关于厌氧菌的氧毒害机制 无 无活力 无活力 严格厌氧菌 无 无活力 有活力 耐氧性厌氧菌 有 有活力 有活力 好氧菌 细胞色素系统 过氧化氢酶 超氧化物歧化酶 (SOD) 菌类型 经过广泛调查不同微生物中SOD和过氧化氢酶的分布状况后得出: SOD的功能: 保护好氧菌免受超氧化物阴离子自由基的毒害,从而提出了缺乏SOD的微生物必然只能进行专性厌氧生活的学说。 根据微生物与氧的关系可 细分为5类 1. 专性好氧菌(obligate or strict strictaerobe) 必须在较高浓度分子氧(~0.2巴)的条件下才能 生长,它们有完整的呼吸链,以分子氧作为最终氢受体,含有超氧化物歧化酶(superoxide dismutase ,SOD)和过氧化氢酶(catalase)。 绝大多数真菌和许多细菌、放线菌都是专性好氧菌, 例如,Acetobacter(醋杆菌属)、 Azotobacter(固氮菌属)、 Pseudomonas aeruginosa(铜绿假单胞菌,又称绿脓杆菌)、 Coeynebacterium diphtheriae(白喉棒杆菌)等。 2. 兼性厌氧菌(facultative anaerobes) 是以在有氧条件下的生长为主也可兼在厌氧条件下生长的微生物,有时也称“兼性好氧菌” (facultative aerobes)。它们能在有氧时靠呼吸产能;无氧时借发酵或无氧呼吸产能,细胞含SOD和过氧化氢酶。 许多酵母菌和不少细菌都是兼性厌氧菌。 例如,Saccharomy cescerevisiae(酿酒酵母)、 Bacillus licheniformis(地衣芽孢杆菌)、 肠杆菌科的各种细菌包括E.coli、 Enterobacteraerogenes(产气肠杆菌,旧称产气气杆菌或产气杆菌)、 Proteusvulgaris(普通变形杆菌)等。 3. 微好氧菌(microaerophilic bacteria) 只能在较低的氧分压(0.01~0.03巴,正常大气中的氧分压为0.2巴)下才能正常生长的微生物。也是通过呼吸链并以氧为最终氢受体而产能。 例如,Vibrio cholerae(霍乱弧菌)、 Hydrogenomonas(氢单胞菌属)、 Zymomonas(发酵单胞菌属) 和Campylobacter(弯曲菌属)等。 4. 耐氧菌(aerotolerant anaerobes) 即耐氧性厌氧菌的简称。 是一类可在分子氧存在下进行发酵性厌氧生活的厌氧菌。它们的生长不需要任何氧,但分子氧对它也无毒害。它们不具有呼吸链,仅依靠专性发酵和底物水平磷酸化而获得能量。耐氧机制是细胞内存在SOD和过氧化物酶,但缺乏过氧化氢酶。 一般的乳酸菌多数是耐氧菌, 例如,Streptococcus lactis(乳链球菌)、 S.faecalis(粪链球菌)、 Lactobacillus lactis(乳酸乳杆菌)、 Leuconostoc mesenteroides(肠膜明串珠菌
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