cDNA文库与EST序列分析.pptVIP

cDNA文库构建及EST序列分析 陈威、丁立建、黄显军、刘振英、毛海花、上官巧灵、朱竹君 （按姓氏首字母排列，排名不分先后） 目录 ——黄显军 cDNA基因文库： 某生物某一发育时期所转录的mRNA经反转录形成的cDNA片段与某种载体连接而形成的克隆的集合。 1. cDNA文库背景简介 1.1 cDNA文库产生前的技术概况 随着生物及信息技术的迅速发展，寻找新基因、克隆新基因、进而研究基因的功能已成为功能基因组研究中的一项重要工作。 在过去寻找新基因的方法有： a）消减杂交 b）mRNA 差异显示 c）cDNA 的代表性差异显示分析法 d）差异消减展示等方法 这些方法在新基因的发现方面都各有其独特的优势，可寻找出一些差异表达序列，但这些差异表达序列大部分情况都是不完整的基因。 1.2 cDNA文库的产生 由于以前技术的缺点，目前，比较可行而且应用较多的方法主要是 cDNA 文库的筛选。 一方面 cDNA 文库只代表一定时期一定条件下正在表达的基因，是整个真核基因组中的少部分序列，因此 cDNA 克隆的复杂程度比直接从基因组克隆的要小