《发光法支原体检测试剂盒》说明书（版本170605）.pdf

《发光法支原体检测试剂盒》说明书 （版本170605） 货号 LM009 储存条件 产品为冻干品，随干冰或冰袋运输，收到产品后，溶解之前，请放-80 ℃冰箱低温保存。该条件下，至少可 以保存5 年。溶解之前，放-20 ℃冰箱，可以短期保存 1-2 个月。有条件，请尽量放-80 ℃冰箱保存。 当冻干品溶解后，在冰上操作，按每管50 μL 分装到1.5 mL 离心管中，分装后，立即在-80 ℃冰箱低温保存。 该条件下，至少可以保存3 年。注意：冻干品溶解后不能放-20 ℃保存！ 产品用途 《发光法支原体检测试剂盒》专门用于检测体外培养的哺乳动物细胞是否被支原体污染。 产品简介 哺乳动物细胞的培养，支原体（Mycoplasma ）污染是个世界性的问题。支原体污染几乎可以改变细胞的所有 参数，导致实验结果的不准确、甚至完全错误（支原体污染对细胞的详细危害，请参考本公司的网站： ）。从2013 年开始，《Nature》期刊已正式要求投稿的文章，如涉及细胞培养都要进行支原体 检测。相信会有越来越多的高水平期刊将做出同样的支原体检测要求。 培养法是相对可靠的支原体检测技术，但是该方法非常耗时的，需要数周，不适合作为细胞培养液中支原体 污染的快速检测。此外，通过固体培养法无法检测污染细胞的一种最常见的支原体，即猪鼻支原体（M.Hyorhinis ）。 这是因为猪鼻支原体无法在支原体固体培养基上形成可见的菌落。而猪鼻支原体约占所有支原体污染的20-50%。 有的实验室使用荧光染色法检测支原体，但是该方法灵敏度太低，当检测成阳性时，细胞经常已经严重污染。 目前，细胞培养液中支原体污染的检测通常使用的是PCR 法。但是PCR 法也有明显的缺点：（1）整个过 程大约需要3 个小时；（2 ）由于细胞培养数天后，培养液中经常含有严重抑制PCR 扩增的代谢物，所以样品的 前处理一般是PCR 法不可或缺的环节；（3）PCR 产物的电泳，需要用到EB 等潜在的致癌物质。 本公司已经开发出了专用于体外细胞培养的《一步法恒温支原体检测试剂盒》，与PCR 法支原体检测相比， 其具有许多优点：耗时短、灵敏度高、操作简单、不会被细胞代谢产物抑制、结果无需电泳肉眼可直接判断等。 尽管如此， 《一步法恒温支原体检测试剂盒》可能也有个小缺点：因为《一步法恒温支原体检测试剂盒》需 要至少同时使用4 条引物才能完成扩增，其引物设计相对困难。虽然经我们测试，该试剂盒至少可认识其说明书 中列举的 13 种支原体，而这13 种支原体大约占污染细胞的支原体种类的99%左右。但是，不排除 《一步法恒温 支原体检测试剂盒》无法识别个别在体外细胞培养中出现概率极低的支原体。为此，我们特意开发了具有广谱识 别能力的《PCR 法支原体检测试剂盒》作为补充。 此外，作为支原体检测领域的共识：单独使用目前市面上的任何一种支原体检测试剂盒，都无法做到 100% 正确，既不会漏检（假阴性），也不会多检 （假阳性）。严格的支原体检测，至少需要使用两种，最好使用三种 不同原理的支原体检测方法同时进行检测，才能使检测结果接近 100%正确。 为了进一步满足支原体快速检测市场的需求，我们特意开发了第三种支原体检测试剂盒，即《发光法支原体 检测试剂盒》。 如果您想得到 100%正确的支原体检测结果 （比如，开展细胞治疗的客户，进行干细胞培养的客户，生产血 清、胰酶、培养液的客户，出售各种原代培养细胞系和肿瘤细胞系的客户等），任选本公司生产的《一步法恒温 支原体检测试剂盒》、《PCR 法支原体检测试剂盒》和 《发光法支原体检测试剂盒》中的两种进行检测，将会得 到比较满意的结果，检测的正确率应该在99.9% 以上。如果同时使用这三种试剂盒进行检测，检测的正确率应该 在99.99% 以上。 如果将所有待测样品统一接种到支原体液体培养基，然后在 37℃培养箱中培养 3 天后，再用本公司三种支 原体检测试剂盒同时进行检测，则基本可以确保您的检测结果100%正确！ 通过将待测样品接种到支原体液体培养基培养3 天的目的是：防止一些支原体含量极其微量的待测样品（比 如：细胞培养用的血清、胰酶、抗生素、培养液和极个别的细胞培养上清），如果不经过大量繁殖，有可能漏检。 上海易色医疗科技有限公司（ ） 电话：021邮箱：yisemed@163.com QQ: 2743752129 产品原理 《发光法支原体检测试剂盒