hrmA诱导水稻抗病性的研究.pdf

致 谢 本论文是在导师郭泽建教授的悉心指导下完成的，从论文的选题、设计、方案的 制定实施到研究结果的分析籀理及论文的撰写的各个环节都凝结着导师的心血与智 慧。导师渊博的知识、严谨求实的治学作风、把握科技前沿的进取精神以及忘我的科 研精神使我受益匪浅。谨此对郭老师的教诲致以衷心的感谢和崇高的敬意。 三年时问里，得到了浙江大学生物技术研究所许多老师和同学的热情帮助利支持， 特别是李德葆老师干¨梁五生老师在备方面的关心和帮助．在此对他们表示衷心的感谢。 感谢浙江省农科院植保所柴荣耀副研究员在水稻稻瘟病菌接种及抗病性鉴定方面 给予的大力帮助。 在中国农业大学学习的日子里，得到彭友良老师及其实验室赵文生老师和实验室 里张连洪、卢峰等同学的热情帮助，在此表示衷心的感谢。 感谢本验室以及中国农业大学分子植物病理实验室的兄弟姐妹们在本课题研究和 论文撰写中给予的帮助．三年的同窗相伴，互勉互励，使我终生难忘。 感谢所有众多热情帮助和支持我的同学和朋友。 特别感谢郭辉华小姐几年来对我学习和生活的理解、关心和无私帮助! CrJ哭心、 我要对一直关爱着我的父母和家人致以诚挚的感谢，没有他们在生活一L 支持乖11、1-出，我是难以顺利完成学业的。 感谢国家重点基础研究基金(G2000016205)对本研究的资助。 吴学龙 2004年5月 杭州华家池 中文摘要 hrmA诱导水稻抗病性的研究 从丁香假单胞菌(Psuedomonas J中分离的hrmA基因是 syringaepv．syringae 在寄主烟草上具有类似无毒基因功能的基因。而且，P．s．syringae处理水稻能诱导 水稻产生抗病性。本研究主要是对转hrmA基因水稻的抗病性进行研究分析。 首先对转hrmA基因植株进行了观察和分子生物学鉴定。温室中生睦正常小苗移栽 至实验火田生K、结实。根据后删死亡与否、以及结实情况分为三火类，第一类，未 及抽穗或者抽穗阶段死亡的9个株系：第二类，产生少量穗子但未能结实的8个株系： 第三类，正常抽穗和结实的18个株系。本研究中所涉及的株系为11个止常抽穗利结 实的第三类株系。PCR检测Tl代以及T2代转基冈的各个株系，得到了8个附陀株系。 Northern Blot分析检测不到这些株系中hrmA基因的表达，RT—PCR分析发现这些株 转基因水稻中的hrmA基因表达丰度没有明显的差异。 其次对转基因水稻的稻瘟病菌抗性进行了分析。对野生型非转基囚水稻致病稻瘟 病菌97-220E3活体接种的病情统计结果表明，转基因水稻的病情要弱一两个等级。 等病程相关基因的表达丰度都要比野生型水稻有所提高，甚至表现为弱组成性的表达。 这说明hrmA基因诱导水稻对稻瘟病菌的抗性提高，而这种抗性提高町能是通过hnnA 基因诱导病程相关基因的提高起作用。 最后研究了植物特有的WRKY转录因子家族参与hrmA基因诱导水稻抗性提高的 基因。采用简略阵列分析了转基因样以及稻瘟病菌诱导样中WRKY基因和一些病程相 基因验证阵列的结果表明，这些方法得到的结果基本一致．即WRKY基因家族参与 hrmA基因诱导水稻的抗性反应，且这种抗性反应和hrmA基因的表达丰度是相关的。 4 Abstract rice hrmA enhancedisea