血清碱性磷酸酶活性测定16.pptVIP

血清碱性磷酸酶活性测定 ————磷酸苯二钠法 主要内容 ⑴ 实验目的 ⑵ 实验原理 ⑶ 实验器材与试剂 ⑷ 实验操作 ⑸ 计算 ⑹ 临床意义 ⑺ 注意事项 ⑻ 思考 ? 实验目的 掌握酶活力测定的一般方法 掌握血清中ALP活力测定方法 掌握血清中ALP测定的临床意义 ? 思考 ？ 如何测定酶活力的大小？ 酶活力测定方法 终止测定法（或定时法）： *本次实验的方法 通常是酶作用一段时间后，加入强酸、强碱、蛋白沉淀剂等终止酶促反应，测定这段时间内底物的减少量或产物的生成量，计算酶促反应的平均速度。 连续监测法： 连续监测法是指每隔一定时间（2～60s），连续多次测定酶反应过程中某一反应产物或底物量随时间变化的数据，求出酶反应初速度，间接计算酶活性浓度的方法。 适用于自动生化分析仪 目前已取代固定时间法而成为临床实验室测 ? 实验原理 测定ALP的方法主要分为两种 一是测定底物解离下的磷酸根来计算酶活力，如β-甘油磷酸钠法，但存在血清本身有磷酸根的缺点； 二是测定底物解离磷酸根后的羟基化合物，这种方法又可分为： 酚化合物在显色剂的作用下显色比色测定。 生成的酚化合物本身在一定的条件下就可显色，如对硝基苯磷酸二钠（PNPP）法 在PH=10的环境中， ALP催化磷酸苯二钠水解 → 苯酚和磷酸氢二钠 苯酚与