原创力文档- 1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
植物中叶绿体色素含量的测定
植物叶绿体色素含量的测定;高等植物叶绿体色素; 叶绿素吸收光谱：;
;红光区; 叶绿体色素提取液中各色素的吸收光谱虽有不同，但又存在着明显的重叠，在不分离的情况下同时测定叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素的浓度，可分别测定在663nm、645nm（分别是叶绿素a和叶绿素b在红光区的吸收峰）和475nm的光吸收，然后根据Lambert-Beer定律，计算出提取液中叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素的浓度。
A663=82.04Ca+9.27Cb （1）
A645=16.75Ca+45.60Cb （2）;将上式整理，可以得到下式：
Ca=13.95A665- 6.88A649
Cb=24.96A649 – 7.32 A665
CT= Ca + Cb =18.08A649-6.63 A665
CX.C=(1000A470-2.05Ca-114Cb)/245; 叶绿体色素，不溶于水，易溶于乙醇、丙酮等有机溶剂。同时，叶绿体色素在植物细胞内是以色素蛋白复合体的结构存在的。故通常用80%的丙酮或95%乙醇提取叶绿素。;
; 实验步骤
1．取2种新鲜玉???（完全/缺素）叶片，擦净组织表面污物，剪碎（去掉中脉），混匀。
2．各称取0.2g，分别放入研钵中，加少量石英砂和碳酸钙粉及2ml95％乙醇，研成匀浆，再加少量95%乙醇，多次研磨至组织发白，静置片刻。;实验步骤
3．取滤纸1张，置漏斗中，用95%乙醇湿润，沿玻棒把提取液倒入漏斗中，过滤到25ml容量瓶中，用少量95%乙醇冲洗研钵和研棒数次，将液体全部倒入漏斗中。
4．用滴管吸取95%乙醇，将滤纸上的叶绿体色素全部洗入容量瓶中。直至滤纸和残渣中无绿色为止。最后用95%乙醇定容至25ml，摇匀。 ; 实验步骤
5．把叶绿体色素提取液倒入光径1cm的比色杯内。以95％乙醇为空白，在波长665nm、649nm和470nm下测定吸光度。; 95%乙醇提取液中色素计算公式：
① Ca=13.95A665- 6.88A649
② Cb=24.96A649 – 7.32 A665
CT= Ca + Cb =18.08A649-6.63 A665
③ CX.C=(1000A470-2.05Ca-114Cb)/245
以上是求出叶绿素总浓度，mg.L-1 ;按以下公式计算各色素含量(mg.g鲜重-1 ) ：
叶绿体色素含量 =
;注意事项：
1、研磨要在弱光下进行，且速度要快；
2、研磨时要加入少量的碳酸钙，保护叶绿素；
3、残渣中的色素要充分洗脱；
4、波长要调准；
5、比色液不能混浊。
;思考题
文档评论（0）