卵巢癌细胞株SKOV-3ipl缺氧调亡与适应及其机制分析.pdfVIP

致 谢 焦此论文竞戏之隧，我衷心她感谢我的嚣烬丰有吉教授。在疆 究的选题及研究过程中，丰老师为我付出了大量辛勤的劳动，给予了 我学术上严格悉心的指导和无微不至的关心。无论研究过程中或工作 中磁到器难与挫新，导师都给予我有力的支持与鼓励。导，雨精湛的医 术、严谨的学风使我在学术上褥蕴匪浅，薯褥终身受益；导拜裹邋的 品质、博大的胸襟以及朴素的生活作风是我一生学习的榜样! 我衷心地感谢导师小组周先荣教授、朱铭伟、周抗美副研究员的 指导与帮助；感落葛襁青老筛为我多次提供缁施株。潦谢上海市第一 人民医院孛心实验室徐薄老师奁细胞培葵方甏辑绘予的帮助与指导； 感谢谢匡成与陈雅芳老师在流式细胞检测方面所给予的帮助；感谢李 惠明老师及谢东华博士在western blot检测方面所给予的有力支持与 指警；感诱病理科杨芗毡瑞主任在病理切片制佟与摄影方面掰给予的帮 助。还要感淤在选题过程巾美国哈馋大学王政博士及美国Pf垃er公震 给予的指导和帮助。 借此机会还螫特别感谢在我的临床工作和研究过程中给予我大 力支持与帮韵酶上海市第一人民医院严伟院长，教育处郡燕处长及万 文老烬。 特别感谢我科酆豫增教授、孙廷慰教授对我的悉心培养和无微不 至的关怀。 感谢我辩万夺平教授、霹骁薇甏教授对我在科磷过程中的关心、 帮助与有力支持。 感谢陈建剩博士、张流赞老师、李双弟及严沁医师以及其他关心 帮助过我的阕事、嬲友熟。 在我研究生课程学习与科研过程中，我的父母和妻予给予我一惯 的支持与鼓励。谨以此文感谢家人的支持 中文摘要 各秘嶷体癌都不瓣程度存在缺氧，缺氧露戳号|起瓣癣镪稳疆亡。 毽是近年囊酶研究发现牌癀缨飕爵殴盼袋氧产生耐受，撬涌亡。探讨 肿瘤细胞遗应缺氧环境及抗凋亡的机制对于浔找临床治疗的新的怍 耀靶点其青熏要意义。缨鼹网翔汝改变，特嬲是G；麓阻滞，饕被谈为 是肿瘤缨臌逃避缺鬣掇亡妁重要壤割，因必好t嫂缨熬辫歉戴壤度瓣 受。健是避嬲的磷究发瑰缀胞周期的改变仪发生予有限的嚣霉闻+缺氧 的舯瘤细胞可以通过基因表达的改变耐受缺氧。抗凋亡艇融Bcl．2襁 多种细魏缺氯模鳖中袤这增加，缺氧遥霹潋诱导VEGF袈达增加。提 示Bct-2与VEGF表这瓣擦霹麓与瓣瘸缨骢抗秧镱凋亡鸯关。 本文选择卵巢癌细胞株SKOV-3ipl，观察在缺氧环境巾 探讨其与缁稳周鬻及Bcl。2与VEGF表达改燮沟关系。姣氧培养0孵 培养细胞，邋过流式细胞分析术及兔疫组化PARP标记检测缺氯培养细 胞熬凋亡及滚式缨臌分擀术捡测纲魏周期改变，圊辩应耀WeStem Cell 硕究结果：流式细胞分析术及免疫组化PARP标记检测，缺氧罐养8小 时，SKOV-3ipl细胞凋亡达到高峰，16小时后减少，24小时后恢复到缺 氧蓊隶乎；鼷氧跨莽SKOV-Sipl缀麓发生缎藏瘸鬻锈援隧滞，翟楚 这种变化仅发生于缺氧8～16小时，24小时质细胞周期恢复到缺氧前 永予；PCNA表这在缺氧8～16小时翳显下降，24，j、时屠回升。表髓袄 氧培养8～16小时细胞增殖抑制，24小时后恢复增殖。缺氧培养黔16 小时，Bcl-2蛋叁表达与0枣时攘毫无差舅，怒是24，j、翼重后嗳显上舞； 有氧培养及缺氧培养到8～16小时均无VEGF表达，但是缺氧24小 时后V嚣G擎大量表达。 结论：卵巢癌细胞株SKOV-3ipl在缺氧培养8至16小时内发生 凋亡、绑腿增殖抑制，24小对蜃对缺氧耐受，细胞增殪；细胞对缺 氧的适成与细胞周期阻滞无关，可能与Bcl-2表达增加有关，缺氧同 时可以诱导VEGF表达上调，后脊对体内肿瘸的生长具谢重要意义。 VEGF [关键词]卵巢恶性肿瘤缺飘凋亡细胞周期Bcl-2 Abstract tumorscontaina fractionof micro Malignant significant hypoxi