第九讲吸光光度法.ppt

第九章 吸光光度法 第一节 吸光光度法基本原理 第二节 光度计及其基本部件 第三节 显色反应及其显色条件的选择 第四节 吸光度测量条件的选择 第五节 吸光光度法的应用 第一节 吸光光度法基本原理 9-1-1 吸光光度法的特点 9-1-2 光吸收的基本定律 9-1-3 比色法和吸光光度法及其仪器 9.1.1 吸光光度法的特点 KMnO4溶液的吸收曲线(cKMnO4:abcd) 分子、原子、离子具有不连续的量子化能级，仅能吸收当照射光子的能量hv与被照射粒子的 E激 － E基 ＝（hv）n因为不同物质微粒的结构不同，共有不同的量子化能级，其能量差也不相同,因此对光的吸收具有选择性。若固定某一溶液的浓度 C 和液层厚度 b ，测量不同 λ下的 A ，以吸光度 A 对吸收波长λ 作图，就得到－吸收曲线，即吸收光谱。 初步定性分析：不同物质吸收曲线的形状与最大吸收波长不同。 定量分析：不同 C 的同一物质在吸收峰附近的 A 随 C ↑而增大，吸收曲线是吸光光度法中选择测定波长的主要依据。 3.目视比色法和吸光光度法的特点 9.1.2 光吸收的基本定律 第二节 吸光光度法及其仪器 1.目视比色法：比较透过光的强度 标准色阶：在相同条件下显色，目视比较。 特点：灵敏度高，准确度低，不同人看，结果不同，不符合朗伯－比尔定律也可用目视比色法，因为比较的是透过光。 2. 吸光光度法：与光电比色法的原理相同，只是二者获得单色光的方法不同，前者使用滤光片，后者使用光栅、棱镜，因而比光电比色法的准确度和选择性好。 3. 分光光度计及其基本部件： 光源－单色器－比色皿（吸收池）－检测器－显示器 （1）光源 : 钨丝灯:可见、红外 400－1000nm氢灯或氘灯：紫外 160－350nm （2）单色器： a.滤光片：有机玻璃片或薄膜，利用颜色互补原理。 b.棱镜：根据物质的折射率与光的波长有关。玻璃棱镜:可见,石英棱镜:紫 外、可见。 c.光栅：在玻璃片或金属片上刻划均匀的线，1200条/mm, 衍射、干涉原理。 第三节 显色反应及其显色条件的选择 9.3.1 显色反应 9.3.2 显色条件的选择 9.3.3 测量波长和吸光度范围的选择 9.3.4 参比溶液的选择 9.3.5 标准曲线的制作 9.3.1显色反应 1.定义：将待测组分转化成有色化合物的的反应。 M ＋L＝ML 2.要求: （1）选择性好； （2）灵敏度高，104； （3）有色化合物ML要稳定，不分解； （4）ML的组成要一定（只ML无 MLn）； （5）ML与L颜色差别大,吸收峰波长差： 60nm. 3.显色剂：要满足以上要求。无机显色剂在光度分 中应用不多，这主要是因为生成的络合物不稳定，灵敏度和选择性也不高。在 分析化学中应用较多的是有机显色剂，有机显色剂及其产物与它们的分子结构有密切关系 9.3.2显色条件的选择 1、 溶液的酸度：M＋L＝ML（显色剂L存在酸效应L（H）） a. 影响显色剂的溶度 b. 影响M的存在状态 c. 影响ML的组成和稳定性，如Fe3＋－磺基水杨酸pH组成颜色 2-3 1：1 紫红 4-8 1：2 棕褐 8-10 1：3 黄色 2.显色剂用量:显色剂过多有时会引起副反应，加入量要严格控制，可通过实验确定。 3.温度：通过实验确定温度范围，通常在室温下进行。 4.溶剂：一般螯合物在有机溶剂中溶解度大，提高显色反应的灵敏度。如Cu(SCN)42－在水中大 部分离 解，几乎无色；在丙酮中呈蓝色。 5.显色时间：通过实验找出适宜的显色时间。 6.干扰组分：共存组分与显色剂生成有色络合物，正干扰；生成无色络合物，负干扰。 干扰的消除： a.制一定酸度，使干扰组分不生色。 b.掩蔽剂，与干扰组分生成无色物。 c.选择适当的波长。 d.选择适当的参比液 e.分离干扰组分 9.3.3测量波长和吸光度范围的选择 1. 测量波长的选择 (1)“最大吸收原则”：选择被测物质的最大吸收波 长的光作为入射光。(无干扰) (2)”吸收最大，干扰最小”：在最大波长处有其他 物质