动物总RNA快速提取试剂盒（离心柱型）.PDFVIP

动物总 RNA 快速提取试剂盒（离心柱型） GK3015 25 次反应 GK3016 50 次反应 一. 试剂盒组成 Components GK3015 GK3016 RnaEx TM(Trizol) a 30ml 60ml GenClean b column 25 2x25 2.0-ml Collection Tube 25 2x25 1.5-ml Collection Tube (RNase free) 25 2x25 Buffer RWA 40ml 2x40ml DEPC-H2O 2x2ml 3x2ml Protocol 1 copy 1copy 用户自备试剂、材料： 氯仿、异戊醇、无水乙醇、Tips （RNase-free） 二. 注意事项 TM 1. RnaEx 为强腐蚀性物质，请勿接触皮肤衣物等，如不小心接触皮肤请立即用大量水冲洗，或就医。该试 剂独立包装，收到后小心存放于 4℃。 2. Buffer RWA 中已含有乙醇，使用完后及时盖好盖子，以避免RNase 污染和乙醇蒸发。 3. 试剂盒中的 GenClean 柱和 2ml、1.5ml 收集管已经过 DEPC 和高温高压蒸汽灭菌处理。柱、收集管可以 重复进行 DEPC 处理和高温高压蒸汽灭菌处理，烘干温度为 90℃左右。 三. 基本原理 研究基因的表达和调控需要从组织或细胞中分离纯化 RNA。RNA 质量的高低常常决定 cDNA 构建，RT- PCR 和 Northern Blot 等分子生物学实验的成败。RnaExTM 是一种新型总 RNA 抽提试剂，内含异硫氰酸胍等 物质，能迅速破碎细胞，抑制细胞释放出的核酸酶。Genclean 柱中的膜能选择性的与 RNA 结合，而蛋白等 杂质不能结合，结合的 DNA 和其它杂质用 Buffer RWA 洗去。结合在膜上的 RNA 经 DEPC-H O 洗脱，可用于 2 各种分子生物学实验。 四. 产品特点 1. 高纯度溶液和纯化系统保护 RNA 在提取过程中不被降解； 2. 漂洗液 Buffer RWA 已经直接加好乙醇，便于客户使用。 3. 小份包装的试剂方便使用，并且可有效减少 RNase 的污染。 4. 采用柱纯化方式，不需要异丙醇沉淀过程，方便快捷，实验成功率高。 五. 准备工作 RNA 酶(RNase) 是导致 RNA 降解最主要的物质，非常稳定。在一些极端的条件可以暂时失活，但限制 因素去除后迅速复性。用常规的高温高压蒸汽灭菌方法和蛋白抑制剂都不能使 RNase 完全失活。它广泛存 在于人的皮肤上，进行与 RNA 制备有关的分子生物学实验时，必须戴一次性干净手套；使用 RNA 操作专用 试验台；操作过程中避免讲话等等。 RNA 实验用的器具建议专门使用，不要用于其它实验。 塑料制品、玻璃和金属物品的处理 1) 塑料制品：尽可能使用一次性无菌塑料制品。已标明 RNase-free 的塑料制品，如没有开封使用过， 通常没必要再处理。对于国产塑料制品，原则上都必须处理后方可使用。处理方法如下： 在玻璃烧杯中注入去离子水，加入 DEPC 使其终浓度为 0.1%。注意：DEPC 为活性很强的剧毒物，须在 通风柜中小心使用。将待处理的塑料制品放入一个可以高温灭菌的容器中，注入 DEPC 水溶液，使塑 料制品的所有部分都浸泡到溶液中，在通风柜中 37℃或室温下处理过夜。将 DEPC 水溶液小心倒入废 液瓶中，将