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南开大学砸t：研究生毕业(学位)论文 摘要
摘 要
泡沫病毒是反转录病毒家族七个属中的一个。鉴于它没有明显的致病
性，因此可将其开发为基因转移载体。该病毒是RNA病毒，基因组RNA反
转录为DNA，再整合到宿主细胞的基因组上进行复制。病毒颗粒包含两条相
同的基因组RNA，在其5’端以非共价键连接，形成一稳定的结构，称为二
聚体连接结构。
本文以牛泡沫病毒BFV3026中国毒株为材料，就其二聚化连接位点及其机制
展开探讨。通过与其它反转录病毒比较，我们将体外转录的BFV3026基因组
RNA
l一1567nt作为二聚化的研究对象。利用缺失突变和互补的DNA寡聚核
苷酸链来削弱RNA二聚体的形成方法，将二聚体连接位点确定到两段不连
1319．1
续的区域： 位于 324nt(TGGGGC)和 1380．1395nt
(TATcCCTAGGGAAcT，分别称之为S
I和Sll，其中sI与引物结合位
点重叠，SII则包含一个泡沫病毒共有的回文序列，二者协同促成BFV3026
基因组RNA片段在体外的迅速聚合，所形成二聚体的Tm值为53℃。
Gag蛋白在体内促进并稳定RNA二聚化的形成，因此我们还克隆了BFV
3026
gag基因，并在E．coli中进行表达。SDS—PAGE及Western
blot证实：表
达的蛋白占菌体总蛋自的40％。本工作为研究RNA二聚化和Gag对RNA的
识别、包装中的作用奠定了基础。
关键词：牛泡沫病毒3026：二聚化连接位点：体外转录：gag基因表达
南开大学砸I-：nJf究生毕业(学位)论文 摘要
Abstract
the of
oneofseven of retroviruses．In
genera family
Foamyviruses(FV)constitute
a in
the ofevidenceforFV is interest
viewof lack being
pathogen，thereincreasing
itasavectorfor isaRNAvirusthat viareverse
delivery．FV replicate
exploiting gene
their RNAa which into host
of intoDNA the
transcriptiongenomic copy integrates
cellular viral are inthat containtwo
genome．The diploid they identical
particles
of RNAin
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