水样中铅离子含量的测定.pdfVIP

第28卷 第1期 摇 摇 大 学 化 学 Vol.28 No.1 摇 2013年2月 UNIVERSITY CHEMISTRY Feb.2013 摇 水样中铅离子含量的测定 ———介绍一个分析化学研究型教学实验 淤 于 于 * 白金燕 摇 马福祥 摇 贺兰 摇 金燕 (陕西师范大学化学化工学院摇 陕西西安710062) 摇 摇 摘要摇 介绍以结晶紫为荧光探针、凝血酶核酸适体为分子识别探针,测定水样中铅离子含量的研究型教 学实验。 讨论了测试体系的酸度、核酸探针与荧光探针的浓度比及其他金属离子对测定结果的影响。 摇 摇 关键词摇 铅离子摇 DNA摇 结晶紫 摇 摇 为了培养本科生的实践能力与探索新知的精神,在基础分析化学实验中增设了研究型实验,让学生 根据自己的兴趣选择指导教师,开展研究工作。 目前环境污染和食品安全方面的问题引起大家的广泛 关注,学生对于利用所学知识进行环境污染监测也非常感兴趣。 铅在工业中的用途很广,同时铅在自然 界中普遍存在,又因为其具有不可降解性和生物富集效应,故易导致铅污染。 铅能作用于人的全身系统 [1鄄4] 和器官,危及神经、消化器官、心血管、肾脏等 。 因此,建立简单、灵敏、快速检测铅离子的方法,对食 品安全和环境监测有重要意义。 在查阅文献的基础上,我们设计了利用荧光探针与DNA作用导致荧光 信号改变检测水样中铅离子的实验。 该实验有助于学生了解科学研究工作的基本过程,培养学生查阅、 归纳总结文献的能力,分析与解决问题的能力,数据分析能力及科技论文写作能力。 1摇 实验原理 摇 摇 结晶紫属于三苯甲烷类染料,分子内容易发生电荷转移,导致平面结构发生扭曲,光活性降低。 结 晶紫本身荧光信号很弱,而当结晶紫与单链凝血酶DNA适体混合后,其荧光信号将有所增强。 在铅离 子存在条件下,单链凝血酶DNA适体发生构型改变,形成四链体DNA,可导致体系的荧光信号显著增 强。 利用这种基于结晶紫与不同结构的凝血酶适体作用方式的差异而引起的荧光信号的改变,可实现 对铅离子含量的检测。 2摇 试剂与仪器 2.1摇 仪器 摇 摇 PB鄄10pH计,电子分析天平,Hitachi F鄄7000荧光分光光度计。 2.2摇 试剂 摇 摇 凝血酶适体(5忆鄄GGT TGGTGT GGT TGG鄄3忆,简称TBA)由上海生工生物工程技术服务有限公司合 成。 三羟甲基氨基甲烷、醋酸、结晶紫(crystal violet,简称 CV)、Pb(NO ) 、KNO 、AgNO 、Cd(NO ) 、 3 2 3 3 3 2 Ca(NO ) 、Mg(NO ) 、Zn(NO ) 、Al(NO ) 、Fe(NO ) 、NaF、乙腈(CH CN)、抗坏血酸(Vc)、三乙醇胺 3 2 3 2 3 2 3 3 3 3 3 (TEA)、乙二胺(EDA)都为分析纯。 配制浓度为1mmol/ L 的结晶紫溶液,10mmol/ L Tris鄄acetate缓冲溶 液(pH分别为6.0,6.5,7.0,7.5,8.0),溶剂均为超纯水。 用 10mmol/ L Tris鄄acetate(pH7.0)缓冲溶液 配制凝血酶适体的储备液,浓度为25滋mol/ L。 淤 于 * 通讯联系人,E鄄mail:jinyan@snnu.edu.cn; 2007级硕士生; 2006级本科生 38 大 学 化 学 第28卷摇 3摇 实验方法 摇 摇 将一定量10滋mol/ L 的结晶紫溶液加入微量荧光比色皿中,检测其荧光信号。 将 10滋mol/ L结晶紫 与